[发明专利]一种便于临床应用的胃泌素释放肽前体检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种便于临床应用的胃泌素释放肽前体检测试剂盒（磁微粒化学发光法）该试剂盒主要由ProGRP校准品、包被ProGRP抗体的磁微粒混悬液、辣根过氧化物酶标记的ProGRP酶结合物和ProGRP样品稀释液组成。本发明可辅助用于肺癌，特别是小细胞肺癌的早期诊断、疾病进程监测及治疗效果评价等。本发明提供的试剂盒有两个优点：1、检测样本在2～8℃可以稳定保存5天，保存时间显著长于市面上的同类试剂盒，更便于临床应用；2.校准品是液态的，避免了因校准品复溶引入的检测误差，检测结果更准确，更便于临床应用。

技术领域

本发明涉及医学检测领域，尤其是涉及一种便于临床应用的胃泌素释放肽前体（ProGRP）含量测定的试剂盒。

背景技术

胃泌素释放肽（GRP）是由McDonald等在1978年从猪的胃组织细胞中分离出的一种具有促胃泌素分泌作用的胃肠道激素，由27个氨基酸组成，是有效的促分泌素或调节肽，广泛分布于哺乳动物的胃肠道神经系统和肺呼吸道。肺癌的癌细胞本身亦可产生并分泌GRP，以自分泌的方式调节自身的生长，并且也可以通过局部弥散的方式与周围的肿瘤细胞膜上相应的受体结合，刺激肿瘤的生长。低水平GRP即可刺激小细胞肺癌（SCLC）细胞DNA合成，因而GRP被认为是SCLC的自主生长因子。但由于GRP很容易被肽链端解酶快速降解，活性部分在血液中不稳定，半衰期＜3分钟，从血液中直接提取可靠的GRP较困难，因而难以在临床上应用。

ProGRP是GRP的前体结构，普遍存在于非胃窦组织神经纤维脑和肺的神经内分泌细胞中，ProGRP根据其部分氨基酸的变异，可分为3种生物大分子，它们具有共同的羧基末端序列31～98序列片段，能够在血液中稳定表达ProGRP，半衰期19～28h，是GRP基因编码的产物。

研究证实，ProGRP羧基末端31～98序列片段水平能够代表GRP水平和GRP基因表达，是一种新的肿瘤标志物。特别针对于小细胞型肺癌，ProGRP和NSE（神经元特异性烯醇化酶）检测SCLC的敏感性分别为73%和60%，特异性分别为98%和92%，相比较NSE诊断早期SCLC的敏感性仅36%，而ProGRP诊断早期SCLC的敏感性可达63%。故通过动态监测，可辅助判断疾病的进程、治疗效果和复发。

在临床上，样本首次检测后，一般会在2～8℃冷藏保存3～5天，以便结果异常时对样本进行复测。然而，目前国内外知名的体外诊断试剂生产商提供的ProGRP检测试剂盒对检测样本的保存时间要求非常苛刻，给临床检测造成了很大的不便。如雅培公司的ProGRP检测试剂盒说明书规定，在2～8℃血清样本只能保存3h，血浆样本也只能保存24h，超过规定时间，检测结果会不同程度的较真值偏低。此外，其说明书还规定样本不能使用含促凝剂的采血管，否则检测结果也会偏低。康乃格公司的ProGRP检测试剂盒只检测血清样本，其说明书规定，在2～8℃血清样本只能保存24h。而且其试剂盒采用的酶联免疫法，反应时间较长（2.5h），操作相对繁琐。罗氏公司的ProGRP试剂盒说明书规定，其样本在2～8℃可以保存72h，基本可以满足临床的需求。但是，作为进口试剂盒，其价格较为昂贵，成本较高。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术所存在的缺陷，提供了一种便于临床应用的胃泌素释放肽前体检测试剂盒，使用该试剂盒，检测样本可在2～8℃保存5天，大大方便了临床操作。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的便于临床应用的胃泌素释放肽前体检测试剂盒，包括如下组分： ProGRP校准品、包被ProGRP抗体的磁微粒混悬液、辣根过氧化物酶标记的ProGRP酶结合物和ProGRP样品稀释液。

所述包被抗体和酶标抗体均为单克隆抗体或多克隆抗体，针对的ProGRP位点不同。

所述ProGRP校准品是将ProGRP抗原按照一定浓度溶解在校准品稀释液中，配制成浓度在0～5000pg/mL之间的6个不同浓度点。