[发明专利]基于检测卡的疫苗抗体检测方法

说明书

本发明公开一种基于检测卡的疫苗抗体检测方法。本发明的检测卡包括试纸条，且试纸条设置有样品垫层、胶体金层、硝酸纤维素膜和吸水层。本发明利用胶体金免疫层析技术，可特异的检测出不同疫苗产生的特异性抗体。由于检测卡方便，样本用量少，仅需50μL血清、血浆或全血即可实现疫苗抗体的检测，并且操作简单，检测速度快，不限场地，适用于临床及社区推广。

技术领域

本发明属于免疫学检验技术领域，具体涉及基于检测卡的疫苗抗体快速高效方法。

背景技术

疫苗是为了预防、控制传染病的发生、流行，用于人体预防接种的预防性生物制品。预防接种用的生物制品包括疫苗、菌苗和类毒素。其中，由病菌制成的为菌苗；由病毒、立克次体、螺旋体制成的为疫苗，统称为疫苗。疫苗是将病原微生物(如细菌、立克次氏体、病毒等)及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。当接种这种不具伤害力的病原菌后，免疫系统便会产生一定的保护物质，如免疫激素、活性生理物质、特殊抗体等；当机体再次接触到这种病原菌时，机体的免疫系统被迅速激活，产生特异性抗体以保护机体。

因为个体体质差异或者疫苗本身及其他客观因素，疫苗注射后机体内是否产生了有效抗体，目前还没有合适的方便、简易、快捷的检测方法。其中疫苗引发机体免疫系统所产生的抗体，可以用胶体金免疫层析法来检测。

胶体金免疫层析技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。优点：

1、使用方便快速，不限场所，所有反应能在15分钟内完成；

2、成本低，不需要特殊的仪器设备；

3、应用范围广，可适应多种检测条件；

4、可以进行多项检测，若样品比较难获得，多项检测可以节省样品，降低成本；

5、标记物稳定，标记样品在4℃贮存两年年以上，无信号衰减现象；

6、胶体金本身为红色，不需要加入发色试剂，省却了酶标的致癌性底物及终止液的步骤，对人体无毒害。

目前，现有技术没有实现方便、简易、快捷且灵敏度高的检测抗体的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于检测卡的疫苗抗体检测方法，其包括以下步骤：

(1)过滤去除待测样品中的杂质得到进样液，

(2)在适于反应的条件下使所述进样液与胶体金颗粒反应进行复合物，其中所述胶体金颗粒的平均直径为15-50nm；

(3)过滤去除步骤(2)中至少部分未结合抗体的胶体金颗粒，得到层析液；

(4)使步骤(3)的层析液进行层析，并使抗体结合于检测线T线；

(5)通过作为对照的C线判断步骤(4)中的结果是否可信。

优选地，本发明的疫苗抗体检测方法中，所述检测卡包括试纸条，且所述试纸条设置有样品垫层和第一过滤层，所述第一过滤层具有允许抗体分子通过但不能允许分子团聚物通过的孔径，且通过所述第一过滤层进行步骤(1)。

优选地，本发明的疫苗抗体检测方法中，所述试纸条进一步包括胶体金层，且所述胶体金层包含玻璃纤维层和分散于所述玻璃纤维层的结合疫苗特异性抗体的胶体金标记物，所述胶体金标记物为针对待检测疫苗抗体的抗抗体和胶体金颗粒的结合物，通过在所述胶体金层进行步骤(2)。

优选地，本发明的疫苗抗体检测方法中，所述试纸条进一步包括第二过滤层，所述第二过滤层具有允许小分子通过但不能允许抗体分子通过的孔径，所述第二过滤层的至少一部分设置于所述胶体金层的下方，且通过所述第二过滤层进行步骤(3)。