[发明专利]一种阿巴卡韦的杂质的高效液相检测方法

说明书

本申请公开了一种阿巴卡韦的杂质的高效液相检测方法，杂质的结构式为其中，R为烷基，烯基，炔基，芳基，羟基，卤素，羟烷基，羧基或酯基；所述方法包括：提供样品分析溶液；将样品分析溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，并记录色谱图；其中所用的色谱柱为反相色谱柱，所用的流动相为酸溶液与溶剂相的混合液。通过上述方式，本申请能够提高检测的分离度和准确度。

技术领域

本申请涉及药物分析技术领域，特别是涉及一种阿巴卡韦的杂质的高效液相检测方法。

背景技术

阿巴卡韦(abacavir，ABC)是一种抗艾滋病新药，为新的碳环2'-脱氧鸟苷核苷类药物，其口服生物利用度高，易渗入中枢神经系统。与其他核苷类逆转录酶抑制剂一样，它是一个无活性的前药，在体内经4个步骤代谢成为具活性的三磷酸酯，并通过以下2条途径发挥抑制人免疫缺陷病毒(HIV)逆转录酶的作用：①竞争性地抑制2'-脱氧鸟苷三磷酸酯(dGTP)(DNA合成片段之一)结合进入核酸链。②通过阻止新碱基的加入而有效地终止DNA链的合成。阿巴卡韦的化学结构式如下：

阿巴卡韦(式VI)的制备方法如下：由式II化合物与式III化合物在碱性条件下反应得到式IV，加入原甲酸三乙酯和盐酸乙醇反应，过滤后得到(1S,4R)-4-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-2-环戊烯-1-甲醇盐酸盐(式V)，再与环丙胺反应得到阿巴卡韦(式VI)

本申请的发明人在长期的研发过程中，发现制备阿巴卡韦(VI)过程中，由于化学反应平衡的关系，总有少量原料残留，被带入到后续的反应步骤中，并会与后续反应中的原料或产品发生反应，因此在合成阿巴卡韦过程中产生很多杂质，这些杂质会影响阿巴卡韦产品的纯度，而目前有部分杂质已经被公开，并有相关检测控制手段，而有的杂质并没有被公开，更没有很好的方法对这些杂质进行检测控制，因此亟需一种科学有效的分析方法对杂质进行检测控制。

发明内容

本申请主要解决的技术问题是提供一种阿巴卡韦的杂质的高效液相检测方法，能够提高检测的分离度和准确度。

为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种阿巴卡韦的杂质的高效液相检测方法，杂质的结构式为其中，R为烷基，烯基，炔基，芳基，羟基，卤素，羟烷基，羧基或酯基；所述方法包括：提供样品分析溶液；将样品分析溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，并记录色谱图；其中所用的色谱柱为反相色谱柱，所用的流动相为酸溶液与溶剂相的混合液。

其中，溶剂相为水-有机相的混合液；有机相为甲醇或乙腈。

其中，流动相中酸溶液与溶剂相的体积比为98:2～2:98；溶剂相中水与有机相的体积比为5:95～25:75；流动相的pH值为1.0～9.0。

其中，采用梯度洗脱的方式进行洗脱，其中，梯度洗脱时，在运行时间的0～20分钟范围内，流动相中酸溶液的体积比为95～70％，在运行时间的20～35分钟范围内，流动相中酸溶液的体积比为70～10％，在运行时间的35～35.1分钟范围内，流动相中酸溶液的体积比为10～95％，在运行时间的35.1～50分钟范围内，流动相中酸溶液的体积比为95～95％。

其中，酸溶液为水溶液，酸溶液的体积浓度为0.01％-0.1％，酸溶液为甲酸溶液、乙酸溶液或三氟乙酸溶液。

其中，反相色谱柱为苯基硅烷键合硅胶色谱柱、氰基键合硅胶色谱柱、氨基键合硅胶色谱柱、十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱或八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。

其中，反相色谱柱的柱长为100mm～300mm，内径为1mm～10mm，粒径为1μm～10μm。

其中，流动相的流速为0.8～1.3ml/min；色谱柱的柱温为25～50℃，检测波长为205～300nm；运行时间为30～70min。