[发明专利]鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例的方法及其应用

说明书

本发明提供了一种鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例的方法及其应用，涉及医学检测技术领域，本发明通过将探针与预处理后的外周血提取的单个核细胞混合，杂交后采用流式细胞计量术采集和分析，能够鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例。通过该方法不仅可以准确找出EBV感染的细胞类型，还可以找出EBV感染细胞占该群细胞的比例，有助于临床针对EBV感染的细胞类型和占比制定针对性的治疗方案，对EBV感染造成的疾病进行高效、准确的治疗，对实施正确的治疗，提高患者的预后有重要作用。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，尤其是涉及一种鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例的方法及其应用。

背景技术

EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)属于4型疱疹病毒，与传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis，IM)、EBV相关淋巴组织增殖性疾病(Epstein-Barr virusrelated lymphoproliferative disorders，EBV-LPD)、 Burkitt淋巴瘤和鼻咽癌等多种疾病密切相关外，还与慢性活动性EBV感染 (chronic active EBV infection syndrome，CAEBV)、EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(Epstein-Barr virus relatedhemophagocytic lymphohistiocytosis，EBV-HLH)和EBV相关T淋巴细胞淋巴瘤 (Epstein-Barr virus genome positive T cell lymphoma)、NK细胞白血病/淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤等疾病有关。

而噬血细胞综合征(Hemophagocytic Lymphohistiocytosis，HLH)是一种由各种致病因素引起的一种致死性疾病，主要病理机制是由于巨噬细胞和CTL细胞异常激活而引起的无效免疫反应导致高细胞因子血症，但具体详细的病理基础仍然未知。根据原发病的不同将HLH分为有基因缺陷的原发性噬血细胞综合征和与感染、肿瘤、风湿等引起的继发性噬血细胞综合征。在感染相关噬血细胞综合征中，Epstein–Barr virus(EBV，EB病毒) 相关HLH(EBV-HLH)是最常见的。国外Chellapandian等认为利妥昔单抗对控制EBV感染有帮助，这与国外EBV感染多为B细胞，且与利妥昔单抗作用于CD20⁺B细胞的机制相对应。

然而在亚洲EBV-HLH患者中，EBV更多地感染非B细胞，有研究认为EBV-HLH中EBV以感染CD8⁺T细胞为主，而CAEBV中以感染CD4⁺T 细胞和NK细胞为主，有研究指出CAEBV中，T细胞中EBV阳性的患者预后差，死亡率高，需要尽早进行造血干细胞移植。而目前国内通用的EBV-DNA的检测不能有效区分EBV感染的淋巴细胞类型及其感染细胞所占的比例。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例的方法，以缓解现有技术中存在的目前国内通用的EBV-DNA的检测不能有效区分EBV感染的淋巴细胞类型及其感染细胞所占的比例的技术问题。

本发明的第二个目的在于提供上述方法在确定EBV感染疾病的治疗靶点中的应用。

本发明的第三个目的在于提供上述方法在指导制备治疗EBV感染的药物中应用。

本发明提供了一种鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例的方法，所述方法包括：

提供预处理后的外周血单个核细胞，将探针与所述预处理后的外周血单个核细胞混合，杂交后采用流式细胞计量术采集和分析，鉴别EB病毒感染淋巴细胞亚群及被感染细胞占该亚群细胞比例；