[发明专利]一种离体断肢保存液及其制备方法

说明书

本发明提供了一种离体断肢保存液及其制备方法，属于器官移植领域。本发明的离体断肢保存液按重量份数计，每1000份含有：低分子羟乙基淀粉10 30‑70份，腺苷1.5‑3份，乳糖醛酸30‑40份，七水硫酸镁1‑1.5份，还原型谷胱甘肽2‑3份，氢氧化钾4‑8份，枸橼酸钠16‑20份，磷酸氢二钠4‑6份，甘露醇8‑10份，L‑精氨酸2‑3份，昆布多糖1.7‑2.3份，别嘌呤醇0.08‑0.15份，硫化氢3‑5份，枸橼酸适量，双蒸水余量。本发明的断肢保存液与UW液和HC‑A液相比。当保存时间大于60小时后，本保存液对于小鼠离体断肢的保存效果优于UW液，并显著优于HC‑A液。

技术领域

本发明属于生物医学技术器官移植领域，具体涉及一种离体断肢保存液及其制备方法。

背景技术

器官移植是20世纪人类医学科学发展所取得的重大技术革新，被誉为二十世纪改变人类生活的重大生命科学进展，是世界公认的治疗多种终末期疾病的有效方法。自20世纪60年代开始在临床上应用，至今已取得了突出猛进的进展。通过器官移植，全世界每年数以万计的患者得以延续生命。器官移植中一个非常关键的步骤是离体器官的储存保护，为临床器官移植提供高质量的供体，这是移植手术成功的先决条件和根本保障。而离体器官保存根本要解决的问题是如何最大限度减少缺血对离体器官造成的各种损伤，使离体器官保持有效的活力，以便完成运送、配型和手术，并在手术后能够更加迅速地恢复功能。

断肢的患者在临床工作中是比较常见的，肢体离断后因缺血缺氧，正常的代谢过程受到干扰而产生一系列的病理生理变化，如代谢和毒性物质堆积、细胞胞浆空泡形成、线粒体水肿、功能下降、溶酶体稳定性下降，导致细胞变性和组织坏死。恢复供血后又会引起一系列病理生理学方面的改变，可笼统称之为缺血再灌注损伤。

断肢离体后需要及时进行再植手术，相关实验及临床数据表明，超过4～6h的缺血时间会影响再植成功率和术后肢体功能康复。大部分患者具有急症再植手术的适应征，而有一些患者却不具备断肢再植的条件，不得不承受由于失去某一部分肢体所带来的生理及心理上的痛苦，致使生活质量下降。这些没有手术指征的患者多是由于多发伤导致生命体征不稳定、路途遥远无法及时到达医院、多肢离断导致手术时间较长等原因所致的肢体坏死。在这些情况下，如果能够妥善保存离断的肢体，延迟其坏死时间，可等到情况允许时再进行断肢的再植。因此，离体断肢体外保存的研究具有非常重要的意义。

近几年来，中国器官的移植数量已经跃居亚洲首位，但临床上除了肾脏保存外，肝、心和胰腺等器官的保存仍比较依赖于进口保存液。人体不同器官对缺血的耐受力差别很大，因而采用保存液进行保存的时限也有不同，如美国研制的UW液对胰或肾脏的储存时间可达72小时，对肝脏储存时间达24小时，但心脏保存一般不超过4～6小时。断肢再植的时限与肢体离断平面和环境因素等有关，一般而言常温下完全缺血6h不会出现不可逆变化，因此常温再植时限一般不超过6小时。

一种成功的保存液的组成应该满足5个要求：(1)减少由于低温保存导致的细胞水肿；(2)防止细胞的酸化作用；(3)防止灌洗液保存过程中细胞间隙的膨胀；(4)防止再灌注过程中氧自由基的损伤；(5)提供再生高能磷酸化合物的底物。

然而，由于断肢的固有特点，如：1、大部分由皮肤包裹，不能如肝、肾等器官一样进行灌注，导致渗透不佳；2、断肢中不同组织对缺血的耐受力差别很大，常温下，肌肉组织的临界缺血时间是4h，神经8h，脂肪13h，皮肤24h，骨组织高达4d。因此，如何研制适用于离体断肢特点的保存液有着十分重要的研究和临床应用价值。

发明内容

本发明的目的就是为了解决上述技术问题，而提供一种离体断肢保存液及其制备方法，以期提供临床上经常需要的离体断肢保存问题。

本发明的目的之一是提供一种适应于断肢器官的离体断肢保存液，所述离体断肢保存液按重量份数计，每1000份含有：