[发明专利]一种以核酸适配体靶向聚乙二醇修饰的介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种以核酸适配体靶向聚乙二醇修饰的介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法。该方法为：通过TEOS、CTAB、碱以及水来合成介孔二氧化硅；再通过APTES在乙醇溶液下，使介孔二氧化硅表面修饰氨基；介孔二氧化硅的伯胺端基与聚乙二醇的羧基反应连接，核酸适配体的末端羧基与介孔二氧化硅上的聚乙二醇的胺基反应连接，连接完成的介孔二氧化硅纳米粒负载降脂药如阿托伐他汀。本发明的特点是核酸适配体与生物靶标高亲和力和高特异性结合，聚乙二醇可提高载体的水分散型和缓释能力，介孔二氧化硅因其独特的介孔结构和巨大的比表面积及表面易修饰等特点，可载不同分子量大小的亲疏水性药物。

技术领域

本发明属于化学药物技术领域，涉及一种以核酸适配体靶向聚乙二醇修饰的介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法。

背景技术

巨噬源性泡沫细胞的形成是动脉粥样硬化主要的细胞学改变，可作为动脉粥样硬化病变诊断和治疗的靶点。泡沫细胞的形成是由于大量摄取氧化型的低密度脂蛋白，清道夫受体负责95%的氧化型的低密度脂蛋白的摄取。核仁蛋白是清道夫受体的一种，而核酸适配体AS1411对核仁蛋白具有高度的靶向。因此通过连接AS1411核酸适配体能很好的靶向泡沫细胞。

介孔二氧化硅是一种有序介孔纳米材料，具有纳米孔道结构规则、孔径可在2~50nm连续可调、表面基团易于修饰、生物相容性良好等优点。但是，由于其粒径较大，这一类传输载体在水溶液中容易聚集、沉淀，从而限制其应用。

聚乙二醇是一种无毒、生物相容性好的两亲性聚合物。在临床医学中，聚乙二醇及其衍生物在用作药物载体发挥了巨大作用，而将其键合到药物分子上的应用还是最近十年被广泛应用。它的分子式两端是羟基，很容易进行化学修饰成端羧基、两端羧基、端氨基或两端氨基。这些键可以与其他化合物进行反应，支载化学药物。利用聚乙二醇化学修饰纳米粒子，可提高载体的水分散性和缓释能力。

发明内容

本发明目的是提供一种以核酸适配体靶向聚乙二醇修饰的介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法。

本发明技术方案如下。

一种以核酸适配体靶向聚乙二醇修饰的介孔二氧化硅纳米粒的制备方法，构建介孔二氧化硅纳米粒，表面通过化学反应连接上良好生物相容性的聚乙二醇和具有靶向性的核酸适配体；

具体为：通过混合硅源TEOS，表面活性剂CTAB，碱以及水来合成介孔二氧化硅；再通过APTES在乙醇溶液下，使介孔二氧化硅表面修饰氨基；介孔二氧化硅的伯胺端基与聚乙二醇的羧基反应连接，核酸适配体的末端羧基与介孔二氧化硅上的聚乙二醇的胺基反应连接，连接完成的介孔二氧化硅纳米粒负载降脂药如阿托伐他汀，即得来发挥靶向动脉粥样硬化斑块的治疗。

上述方法，包括如下步骤：

（1）取0.1~0.3 g CTAB溶解在70~90 mL水，1~3 mL氨水，室温搅拌15~20分钟；所述氨水的质量百分比浓度为25%~28%；

（2）将步骤（1）的产物中在剧烈搅拌下逐滴加入0.6~0.8 mL TEOS，搅拌5~7小时；

（3）室温沉淀12~18小时；

（4）离心收集沉淀，用乙醇洗3~5遍；

（5）于80~100℃真空干燥过夜，500 ~600℃高温煅烧4~5 小时得介孔二氧化硅；

（6）取100~120 mg 介孔二氧化硅，放置于50~70 mL含有25~35 uL APTES（3-氨基丙基三乙氧基硅烷）的乙醇溶液中，室温搅拌18~24 小时；

（7）离心收集沉淀，用乙醇洗3~5遍；

（8）80~90℃真空干燥过夜，得表面修饰胺基的介孔二氧化硅；