[发明专利]一种确定污水处理厌氧氨氧化生物膜最适保存温度的方法

权利要求书

1.一种确认污水处理厌氧氨氧化生物膜最适保存温度的方法，其特征在于，所述方法是基于流式细胞术对厌氧氨氧化生物膜的细胞活性状态进行测定，对比不同温度保存的厌氧氨氧化生物膜与保存前厌氧氨氧化生物膜的细胞活性状态的测定结果，以最接近保存前厌氧氨氧化生物膜的细胞活性状态时保存的温度作为最适保存温度；所述厌氧氨氧化生物膜的细胞活性状态测定包括活细胞、凋亡早期细胞、凋亡晚期细胞和死细胞的含量测定；

所述流式细胞术确认最适温度的步骤包括：

（1）厌氧氨氧化生物膜测试样液的制备：用缓冲液稀释厌氧氨氧化生物样品，震荡均匀后，过滤、离心，留用上清液，使用预冷磷酸盐缓冲液吹洗细胞，重复离心和清洗两次，再取上清液作为样品，使用适量10x Annexin V Binding Buffer混匀制得；

（2）置于流式细胞仪测定各样液的细胞活性状态。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述缓冲液包括磷酸盐缓冲液和胎牛血清。

3.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液包括0.2 mol/L磷酸氢二钠和0.2 mol/L磷酸二氢钠。

4.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述缓冲液中的磷酸盐缓冲液和胎牛血清的体积比为8~10：1。

5.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述缓冲液的pH为7.2~8.0，与厌氧氨氧化生物膜的稀释比为8~10：1。

6.根据权利要求1或2任一所述方法，其特征在于，所述过滤是选用6~8 μm孔径的尼龙膜。

7.一种快速启动厌氧氨氧化生物膜污水处理的方法，其特征在于，利用权利要求1所述方法测得最适保存温度，具体包括：预先将厌氧氨氧化生物膜培养成熟，置于保存基质中在最适保存温度下进行保存，活性恢复后即可用于污水处理。

8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述保存基质包括：KHCO₃ 1500 mg/L,K₂HPO₄ 15 mg/L，MgSO₄ 180 mg/L，CaCl₂ 20 mg/L；保存基质NH₄⁺-N浓度为50 mg/L，NO₂^--N浓度为75 mg/L。

9.权利要求1或7所述方法在污水处理中的应用。