[发明专利]抗人IgG单克隆抗体、其杂交瘤细胞株及应用

说明书

本发明涉及杂交瘤细胞株及其所分泌的单克隆抗体，所述抗体能与人IgG特异性结合。本发明还涉及包括所述杂交瘤细胞株或单克隆抗体的试剂盒。本发明的单克隆抗体在抗体纯度、可重复性、抗体效价和稳定性方面均展现出很好的性能。

技术领域

本发明涉及一种单克隆抗体，特别涉及一种抗人IgG的单克隆抗体，分泌所述单克隆抗体的杂交瘤细胞，以及所述单克隆抗体的应用。

背景技术

风疹病毒属于披膜病毒科，具单股正链RNA，直径为60nm，仅有一个血清型。风疹病毒的抗原结构相当稳定，是一种最危险的致畸因素。风疹病毒与巨细胞病毒、弓形虫病毒、疱疹病毒1型和2型共同命名为TORCH，TORCH检测对于优生优育至关重要。

风疹是由风疹病毒引起的。风疹在我国已列入法定报告的传染病。80年代以来日本、美国、印度、墨西哥、澳大利亚等均有较大的流行。孕妇属易感人群，为避免孕早期受到风疹病毒感染，在孕前必须检查风疹IgG抗体，若IgG抗体阳性则表示曾经感染过风疹病毒，并有终生免疫力，不会再受感染。若IgG抗体阴性则表示无抵抗力，容易受到风疹病毒感染，因此必须立即注射风疹疫苗，使体内产生抗体。

当前检测风疹IgG抗体的诊断技术有金标、ELISA、PCR等方法。金标试剂操作简单，快速，但肉眼观察有一定误差，准确率低；PCR具有灵敏度极高的特点，直接检测病原体基因，但操作繁琐、需要先进的仪器设备和较高的费用，不适用于基层推广；而ELISA检测方法，具有灵敏度高、特异性强的特点，目前临床应用比较普遍，但存在漏检、假阳性等问题。因此研发出经系统性评价结果较好的抗人IgG单克隆抗体在体外诊断试剂领域具有非常广泛的应用。

然而，筛选用于制备体外诊断试剂的单克隆抗体是一个复杂的过程，首先要获得很好的抗原，来制备足够多的抗体，然后对抗体进行系统的评价，获得具有临床相关性的候选抗体，再开发成检测试剂。其中，抗体效价、交叉反应性、稳定性和临床效果等均是重要的评价因素，如抗体效价高低反映了一定浓度下与抗原反应的最低滴度，滴度越低效价越高；抗体交叉反应性可影响该抗体的特异性；抗体的稳定性会直接影响最终结果的可靠性，而稳定性较差的抗体对保存条件、操作条件要求更高，从而降低了其作为诊断试剂的实用性及结果的可靠性，并不可避免地引起成本的上升；临床试验则用来说明抗体在诊断相应疾病或病毒感染时的实际效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗人IgG单克隆抗体、分泌该抗体的杂交瘤细胞株、含上述单克隆抗体或杂交瘤细胞株的试剂盒以及它们在检测人IgG中的用途。通过系统性评价，所述抗体在各方面均有较佳表现，从而适合作为免疫诊断试剂用于制备体外诊断试剂盒。

为此，本发明人进行了大量研究，通过人IgG来免疫小鼠，细胞融合后经有限稀释法克隆至少4次，直到达到单克隆，从得到的众多克隆中筛选到1株能稳定分泌抗体的新型杂交瘤细胞株(Hybridoma)，此杂交瘤细胞株记作杂交瘤细胞株4G10，并于2018年8月23日将其保藏于中国典型培养物保藏中心，中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:C2018174，从而完成了本发明。

在第一个方面，本发明提供了一种杂交瘤细胞株，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2018174。

在第二个方面，本发明提供了一种单克隆抗体，所述单克隆抗体能够与人IgG特异性结合。

在一个实施方式中，所述单克隆抗体不与人IgG、鼠IgG、兔IgG、牛IgG或人IgM结合。

在另一个实施方式中，所述单克隆抗体在反复冻融、长期保存、热加速恶劣条件下具有更优的稳定性和可靠性。

在一个优选的实施方式中，所述单克隆抗体是由本发明的杂交瘤细胞株分泌的抗体。

在第三个方面，本发明提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括本发明的杂交瘤细胞株或单克隆抗体。