[发明专利]一种金纳米颗粒在促进环丙沙星联合超声抑制大肠杆菌活性上的应用

说明书

本发明涉及声动力抗菌化学疗法，属于医药技术领域，本发明公开一种金纳米颗粒(AuNPs)在促进环丙沙星联合超声抑制大肠杆菌活性上的应用，本发明的AuNPs使用传统的柠檬酸钠还原法制备。AuNPs与环丙沙星物理混合后施加超声，可增强环丙沙星对大肠杆菌的抑制作用，有效提高抑菌率，从而减少抗生素的用量，促进抗生素的合理使用，缓解抗生素滥用带来的细菌耐药性问题。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及金纳米颗粒(AuNPs)对环丙沙星联合超声抑制大肠杆菌活性的促进作用。

背景技术

抗生素的滥用已经对人类造成了极大威胁，耐药性细菌在世界范围内迅速蔓延，因此需要建立一种安全高效的方法对抗耐药菌，从而使人类避免遭受耐药菌的危害。声动力抗菌化学疗法是近几年发展起来的对抗多重耐药菌的新方法，该方法利用超声波具有较强组织穿透性的特点，采用超声照射聚集在患病组织的声敏剂，借助激活声敏剂产生活性氧及其诱发的一系列声化学反应或物理作用达到杀伤微生物目的。

近年来，纳米科技的蓬勃发展带动了纳米材料的大规模开发和应用，特别是在医药领域展示出独特的优势。随着对纳米材料的深入研究，发现纳米颗粒既可以降低超声空化阈值，即空化起始的最低压力，并且还可促进体系中羟基自由基的产生，进而起到增强抑菌效果的作用。AuNPs自身毒性小，生物相容性好，副作用小，已被安全的用于抗肿瘤治疗。

研究表明，环丙沙星除了其本身作为抗生素使用外，还具有声动力活性，将其与超声联合使用，可增强其对大肠杆菌生长的抑制。当在药物溶液中加入AuNPs并施加超声后，借助AuNPs可增强超声空化效应及环丙沙星自身声敏性，AuNPs显著增加了环丙沙星联合超声的抑菌效果。

发明内容

本发明的目的在于研究AuNPs对环丙沙星联合超声抑菌活性的促进作用，该方法能有效提高大肠杆菌的敏感性，抑制其生长，且能有效促进抗生素的合理使用。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种金纳米颗粒在促进环丙沙星联合超声抑制大肠杆菌活性上的应用。

所述的应用，具体为将环丙沙星，AuNPs，E.coli和生理盐水依次加入离心管中混合，将离心管放入超声体系中进行超声处理；超声处理后，取溶液置于固体培养基表面，移入37℃培养箱内倒置培养18h，之后进行菌落计数并计算抑菌率。

所述的应用，所述超声体系中环丙沙星浓度为2.5×10^-5～7.5×10^-5mg/mL。

所述的应用，所述超声体系中AuNPs溶液浓度为2.5×10^-4mg/mL。

所述的应用，所述超声体系中大肠杆菌浓度为1×10⁷cfu/mL。

所述的应用，所述超声体系中超声时间为15-45min。

所述的应用，所述超声体系中超声功率为450W，超声频率为40kHz，超声温度为20℃～37℃。

所述的应用，所述AuNPs通过传统的柠檬酸钠还原法制备，平均粒径为18nm。

所述的应用，所述AuNPs的具体制备方法为：将氯金酸水溶液置于三颈瓶中，油浴加热回流，等氯金酸水溶液沸腾后，将柠檬酸三钠溶液快速加入到氯金酸水溶液中；溶液从紫色慢慢变成红色，等溶液变成深红色继续回流5min，之后撤掉热源在室温下冷却，将溶液转移至玻璃样品瓶密闭，在4℃冰箱保存，得AuNPs溶液。

所述的应用，所述氯金酸水溶液浓度为1.0×10^-3mol/L，柠檬酸三钠溶液的浓度为3.38×10^-2mol/L。

本发明具有以下有益效果：