[发明专利]一种细胞浓缩补料培养工艺

权利要求书

1.一种细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，细胞培养过程进行补液和换液，其中，换液过程中，仅细胞被截留，目标产物随液体排出。

2.根据权利要求1所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述细胞培养过程进行补液和换液的步骤为：

细胞接种培养第2-3天，补液，第3-6天换液和补液，以后每天进行换液和补液的操作。

3.根据权利要求1所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述细胞接种至生产设备中培养，所述生产设备包括方瓶、摇瓶、反应器；

进一步地，所述接种的密度为1×10⁵cells/mL至9×10⁶cells/mL。

4.根据权利要求1所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述补液体积均为初始培养体积的3％±0.5％。

5.根据权利要求1所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述细胞截留包括以下方式：离心、中空纤维膜截留或切向流技术。

6.根据权利要求1所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述目标产物包括以下中的任一种处理方式：

在无菌处理方式下将排出的液体储存在2-8℃条件下；

排出的液体浓缩之后无菌过滤后存储在4-8℃。

7.根据权利要求1所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述细胞为杂交瘤细胞、携带外源表达载体的中华仓鼠卵巢细胞；

进一步地，所述目标产物包括抗原、抗体；

进一步地，所述抗原包括HBsAg；

进一步地，所述抗体包括与登革热适配的抗体、PD-1抗体。

8.根据权利要求求7所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述细胞为杂交瘤细胞或表达HBsAg的中华仓鼠卵巢细胞，所述补料所用的溶液均为100g/L的水解乳蛋白；

所述细胞为表达PD-1抗体的中华仓鼠卵巢细胞，所述补料所用的溶液为Efficientfeed^TM C+；

进一步地，细胞培养的整个过程中控制葡萄糖浓度在1-6g/L之间。

9.根据权利要求1-8任一项所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，细胞培养的总时间为7-15天。

10.根据权利要求1-8任一项所述的细胞浓缩补料培养工艺，其特征在于，所述收集的液体还包括分离和纯化的步骤，得到目标产物；

进一步地，所述分离依次采用离心和滤膜的方式进行。