[发明专利]一种抗HER2多克隆抗体在审
申请号: | 201811060497.0 | 申请日: | 2018-09-12 |
公开(公告)号: | CN109134656A | 公开(公告)日: | 2019-01-04 |
发明(设计)人: | 张茂祥;章文;裴毓;章登吉;武勇 | 申请(专利权)人: | 四川妙和生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/32 | 分类号: | C07K16/32;C07K1/22;G01N33/68 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 范晴 |
地址: | 610017 四川省成都市高新*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多克隆抗体 血清样本 初步纯化 效价 制备 亲和柱层析 多次免疫 高灵敏度 效价检测 抗原 抗体 检测 | ||
1.一种抗HER2的多克隆抗体,所述多克隆抗体通过如下方法制备得到:
(1)制备得到HER2抗体,并进行纯化;
(2)将前述的HER2抗体作为抗原对动物进行多次免疫,收集动物每次被免疫后的血清样本,
(3)将所述各个血清样本进行ELISA效价检测,
(4)选择效价大于1:2000K数值的血清样本,进行收集,并进行初步纯化,
(5)将初步纯化的血清样本,进一步进行亲和柱层析纯化。
2.根据权利要求1所述的抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,所述HER2抗体作为抗原至少免疫动物两次。
3.根据权利要求1所述的抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,所述HER2抗体包括鼠源HER2抗体,嵌合HER2抗体,改型HER2抗体,全人源化HER2抗体和表面重塑人源化HER2抗体。
4.根据权利要求1所述的抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,所述HER2抗体的氨基酸序列如Seq ID NO.1所示。
5.根据权利要求1所述的抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,所述动物选自兔子,大鼠,羊或牛,免疫量根据动物体重确定。
6.根据权利要求1所述的抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,步骤(2)中,第一次免疫:每只兔子免疫量为HER2抗体蛋白800μg,使用完全弗氏佐剂;
第14天后第二次免疫:每只兔子免疫量400μg抗原,使用不完全弗氏佐剂;
第29天后第二次免疫:每只兔子免疫量400μg抗原,使用不完全弗氏佐剂。
7.根据权利要求6所述的抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,第49天放血收集兔子血清样本。
8.一种权利要求1‐7任一项所述抗HER2多克隆抗体用于检测HER2抗体的用途。
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