[发明专利]2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐的合成方法

说明书

本发明提供了2,2′‑联氨‑双（3‑乙基苯并噻唑啉‑6‑磺酸）二胺盐（ABTS）的合成方法，属于有机合成领域。2‑羟基苯并噻唑先与2‑溴乙烷反应生成3‑乙基苯并噻唑‑2‑酮，再与水合肼反应生成2,2'‑联氮双(3‑乙基苯并噻唑啉)，再通过与浓硫酸磺化反应生成化合物2,2'‑联氮双(3‑乙基苯并噻唑啉‑6‑磺酸)，最后与氨气反应生成盐得到2,2′‑联氨‑双（3‑乙基苯并噻唑啉‑6‑磺酸）二胺盐。本发明中所用原料价廉易得，操作简单方便，反应条件温和，收率较高。

技术领域

本发明涉及化学合成技术领域，尤其是2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(ABTS)的合成方法。

技术背景

2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(ABTS)可以用于生化研究，游离氯的光谱试剂，酶联免疫吸附试验的显色底物，过氧化物酶的底物,用于ELISA实验。总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTSmethod，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用ABTS作为显色剂，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。目前有关合成2,2′-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐(ABTS)的文献报道很少，只在文献Synthetic Communications, 2014, vol. 44, # 24, p. 3630–3636有过完整报道，除此之外，其它报道也只是涉及ABTS合成过程中的中间体的不同合成方法而已，而没有ABTS的具体详细报道。目前，ABTS价格比较昂贵，合成路线有限，寻求ABTS新的优化的合成方法仍然具有重大意义，这也是化学物质方法学本身应有之意。

发明内容

本发明的目的是提供一种2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐（ABTS）的合成方法。

本发明提供如下合成技术方案，一种2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐（ABTS）的合成方法，本发明合成路线如下：

包括以下步骤：

第一步、将2-羟基苯并噻唑和2-溴乙烷溶于有机溶剂，在碱性条件下反应，得到3-乙基苯并噻唑-2-酮。

第二步、将3-乙基苯并噻唑-2-酮和水合肼溶于有机溶剂，在盐酸催化下，加热回流反应，得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)。

第三步、2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉) 溶于10%发烟硫酸，在冰水浴条件下反应，得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)。

第四步、2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)溶于有机溶剂中，与氨反应得到2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。

本发明所述的方法，第一步中有机溶剂选自四氢呋喃或乙腈；第二步中和第四步中，有机溶剂选自甲醇或乙醇。

本发明所述的方法，第一步中，2-羟基苯并噻唑，2-溴乙烷，碱的摩尔比为1：1.1-1.5：1-1.5。

本发明所述的方法，第一步中，所用碱为氢氧化钠或氢氧化钾，反应温度为室温至溶剂回流。

本发明所述的方法，第一步反应结束可以不经处理，直接加入水合肼进行第二步反应。

本发明所述的方法，第二步中，3-乙基苯并噻唑-2-酮和水合肼与盐酸摩尔比为1：0.5-0.55：0.1-0.2。

本发明所述的方法，第三步中，2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉)与10%发烟硫酸质量为1：5-10。