[发明专利]一种薄荷的种质离体保存方法

说明书

本发明公开了一种薄荷的种质离体保存方法，包括以下技术环节：（1）薄荷植株的预处理；（2）外植体消毒与接种；（3）不定芽诱导培养；（4）种质保存培养；（5）种质复壮；（6）成苗培养；（7）炼苗移栽。本发明提供的方法一个保存周期可保存薄荷种质资源达3‑4年，极大的延长了保存时间，并且保存的种质遗传性状稳定，一旦需要时可通过复壮恢复活性，随时为生产大规模提供种苗，是一种实用价值很高的种质离体保存方法。

技术领域

本发明属于生物技术和农业科学技术领域，涉及一种薄荷的种质离体保存方法，尤其涉及一种利用组织培养技术来实现薄荷种质的长期保存和保存后复壮扩繁的方法。

背景技术

薄荷(Mentha haplocalyx Briq)是唇形科薄荷属的多年生草本植物，全株具有浓烈的清凉香味，是一种适应性强、分布广泛的具有特殊芳香气味的植物资源。薄荷广泛分布于北半球的温带地区，中国各地均有分布，家种、野生皆有，其中江苏、安徽两省栽培产量最大。薄荷具有药用和食用双重价值，其干燥地上部分可入药，具有疏风、散热、解毒的功效，用于治疗风热感冒、头痛、目赤、咽喉肿痛、牙痛、口疮、风疹、麻疹、胸胁胀闷等，是我国常用的传统中药之一；其茎叶可作菜食，也可作为调味剂，还可配酒、冲茶等。薄荷主要成分有挥发油、黄酮类、有机酸、氨基酸等，其中挥发油类是用途最广的成分，经加工后可得到薄荷脑和薄荷素油，被广泛应用于医药、日用化工和食品工业中。

中国是世界公认的薄荷主产国，薄荷产品以香气纯正、异味少、质量好而享誉世界，被誉为“亚洲之香”，在国际市场上有举足轻重的地位。然而在薄荷产业的快速发展中，也出现了一些新的问题。首先薄荷在生产上主要采用根茎、分株和扦插的方式进行无性繁殖。在长期的长期无性繁殖过程中，病毒会逐代积累，爆发严重的病毒病，从而造成薄荷优良种性退化严重，进而影响薄荷的品质和产量。其次是为了满足市场需求，大力推广高产优质的品种，从而造成薄荷品种日趋单一化，这将会导致薄荷以及该属植物基因资源的缩小和衰竭。此外还有薄荷栽培时缺乏科学管理，导致品种混杂退化也致使薄荷产量、质量下降的重要原因。因此，应该加强对薄荷种质资源的收集和保存，包括地方品种、选育的良种、突变种、及稀有种、野生种和近源野生植物，这无疑会对我国薄荷种质资源的利用和品种改良的发展起到重要作用。

目前我国薄荷研究主要集中在药理作用、挥发油和非挥发性成分提取、繁殖培育、栽培管理等方面，而对其种质保存的研究较少。种质保存是指利用天然或人工创造的适宜环境，借以保存种质资源，使个体中所含有的遗传物质保持其遗传完整性，具有高活力，并能通过繁殖将其遗传性传递下去。种质保存的方法大体分为原地保存和异地保存2大类，其中离体保存是通过植物组织培养技术实现了种质资源的异地保存方法。种质离体保存所占空间小，在较小的空间内可保存大量的基因资源，克服了田间保存需占用土地面积大、管理费用高的缺点；同时离体保存技术通常在无菌条件下进行，易于控制，同时可在离体保存的任何阶段进行脱毒处理，避免了病害及自然灾害，减少了田间保存过程中易发生自然变异和种质退化的现象，从而保证了种质的优良性和遗传稳定性。

本发明团队通过对影响薄荷种质保存多方因素的深入研究，最终开发出了一种保存时间久、遗传性状稳定、种质存活率高、复壮效果好的薄荷的种质离体保存方法，对薄荷的产业发展具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种薄荷的种质离体保存方法，该方法既可以用来保存薄荷的野生种质资源，有利于薄荷遗传多样性的延续，也可以用来保存复壮薄荷的栽培种质，作为薄荷繁殖培育的材料。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

一种薄荷的种质离体保存方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）薄荷植株的预处理

选择露地栽培、健壮无病的薄荷1年生植株，用自来水将整个植株冲洗干净，尤其要洗净根部泥土，然后将植株根部浸入含有0.1-0.3mg/L TDZ的营养液中，4℃低温预处理5-8天；