[发明专利]一种基于树脂吸附法分离乳酸链球菌素的方法

说明书

本发明公开了一种基于树脂吸附法分离乳酸链球菌素的方法，用于分离的填料树脂球的粒径为20‑60um，所述的填料树脂中分布着互相连通的孔径为50‑200nm的网孔。本发明通过降低大孔吸附树脂法中用于填料的树脂球粒径的尺寸，极大的提高了分离的分辨率，从而获得纯度更高的乳酸链球菌。同时提高了树脂球中离子交换树脂网格中的孔径的尺寸，孔径尺寸的增大一方面大于待分离的乳酸链球菌尺寸，另一方面便于分离的液体中的其它物质从孔径中通过，大大降低了分离过程的系统压力，最低可到1bar，使得大规模工业化生产变为可能。

技术领域

本发明属于生物分离分析技术领域，具体涉及一种基于树脂吸附法分离乳酸链球菌素的方法。

背景技术

现有的乳酸链球菌素常用分离方法主要有：有机溶剂法、盐析法、泡沫分离法和大孔树脂吸附法。

其中，有机溶剂法主要使用有机溶剂沉淀乳酸链球菌素，然后进行复溶解和再次沉淀，得到乳酸链球菌素粗品。该方法的缺点是大量使用有机溶剂，污染严重，乳酸链球菌素回收率低，且有机溶剂残留率高。

盐析法是在乳酸链球菌素发酵溶液中加入大量硫酸铵或氯化钠，提高溶液中的盐浓度，降低乳酸链球菌素的溶解度而沉淀。该方法缺点是发酵液中的蛋白质也随盐的加入而沉淀，最终产品纯度不高，且需要消耗大量盐。

泡沫分离法主要采用鼓泡塔间歇性分离，再通过盐析、喷雾干燥等方法得到乳酸链球菌素粉末。该方法对设备要求精度高，操作麻烦，且最终产物纯度低。

相比于前三种分离方法，大孔吸附树脂法主要是利用树脂对乳酸链球菌素的吸附作用实现分离，该方法简便易行，但是大孔吸附树脂分离精度差，最终产物浓度低。但是传统的大孔吸附树脂法的分离效果与填充的树脂颗粒的大小相关，填充的颗粒越小，分辨率越高，但是系统压力越高。因此本发明通过改变树脂颗粒的结构优化了基于树脂吸附法分离乳酸链球菌素的方法。

发明内容

针对上述问题，本发明提出一种基于树脂吸附法分离乳酸链球菌素的方法。

实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：

一种基于树脂吸附法分离乳酸链球菌素的方法，用于分离的填料树脂球的粒径为20-60um，所述的填料树脂中分布着互相连通的孔径为50-200nm的网孔。

作为本发明的进一步改进，树脂球的粒优选的为30um，所述的填料树脂中分布着互相连通的孔径优选的为100nm。

作为本发明的进一步改进，所选用的树脂球为离子交换树脂材料，所选用的离子交换树脂表面所携带的电荷的种类与所分离的乳酸链球菌素表面所携带的电荷相反。

作为本发明的进一步改进，所需分离的乳酸链球菌素表面带有正电荷，所选用的离子交换树脂表面携带负电荷。

作为本发明的进一步改进，包括将所述的树脂球填充至层析柱中，先用PH为7.0-8.0的PBS缓冲溶液平衡填充柱中的PH环境，然后再继续使用PBS缓冲溶液进行上样直至乳酸链球菌素分离完全，最后使用NaCl溶液进行洗脱，得到乳酸链球菌素。

作为本发明的进一步改进，所述的层析柱中的柱压为0.8-2.3bar。

作为本发明的进一步改进，所述的NaCl溶液的溶度为0.8-1.2M。

本发明的有益效果：本发明通过降低大孔吸附树脂法中用于填料的树脂球粒径的尺寸，极大的提高了分离的分辨率，从而获得纯度更高的乳酸链球菌。为了避免由于树脂球尺寸的减小所导致分离过程中柱压的增加，本发明同时提高了树脂球中离子交换树脂网格中的孔径的尺寸，孔径尺寸的增大一方面大于待分离的乳酸链球菌尺寸，另一方面便于分离的液体中的其它物质从孔径中通过，大大降低了分离过程的系统压力，最低可到1bar，使得大规模工业化生产变为可能。

附图说明