[发明专利]一种特异性检测铜离子和硫离子的多肽、化学荧光传感器及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种特异性检测铜离子和硫离子的多肽、化学荧光传感器及其制备方法与应用。所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽的氨基酸序列为：HEFH。所述的化学荧光传感器是由所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽与异硫氰酸荧光素链接而成，所述的异硫氰酸荧光素与所述多肽中谷氨酸一侧的组氨酸相连。所述的多肽裂解前加入六氨基己酸，在三乙胺存在下让异硫氰酸荧光素与六氨基己酸反应3~5h得到目标物化学荧光传感器。所述的化学荧光传感器在铜离子检测中的应用为所述的化学荧光传感器在硫离子检测中的应用，所述的化学荧光传感器在细胞毒性检测中的应用。本发明基于多肽的化学荧光传感器选择性好，灵敏度高干扰小，检测限低。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种特异性检测铜离子和硫离子的多肽、化学荧光传感器及其制备方法与应用。

背景技术

金属离子在维持人体正常生理功能方面起着重要作用，是各种蛋白或酶的活性中心，金属离子的富集或缺失都会打乱人体正常的生理平衡。因此，金属离子及时高效的检测对环境的保护、人类的健康和社会的发展都有着重要的作用。

人体内铜主要以铜硫金属蛋白的形式存在，铜硫金属蛋白具有多种生理功能，比如载氧、催化氧化还原反应、传递电子等。铜是人体健康所必需的微量元素，对于血液、中枢神经和免疫系统、头发、皮肤和骨骼组织以及脑子和肝、心等内脏的发育和功能有重要影响，铜含量的缺乏和铜的代谢异常可以引起许多的疾病，譬如，威尔逊病(Wil-sondisease)、门凯氏病(Menkes disease)等。

迄今为止，硫污染已经成为了当今世界主要的环境污染之一。硫化物能刺激呼吸黏膜，导致意识不清、呼吸麻痹，甚至会失去意识。因此，及时又准确地检测环境及人体内的Cu²⁺和S^2-意义重大。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种特异性检测铜离子和硫离子的多肽；第二目的在于提供基于所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽的化学荧光传感器；第三目的在于提供所述的化学荧光传感器的制备方法；第四目的在于提供所述的化学荧光传感器的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽的氨基酸序列为：HEFH。

本发明的第二目的是这样实现的，所述的化学荧光传感器是由所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽与异硫氰酸荧光素链接而成，所述的异硫氰酸荧光素与所述多肽中谷氨酸一侧的组氨酸相连。

本发明的第三目的是这样实现的，包括以下步骤：

A、通过固相多肽合成反应合成权利要求1所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽；

B、在所述的特异性检测铜离子和硫离子的多肽裂解前加入六氨基己酸，在三乙胺存在下让异硫氰酸荧光素与六氨基己酸反应3~5h得到目标物化学荧光传感器。

本发明的第四目的是这样实现的，所述的化学荧光传感器在铜离子检测中的应用。

所述的化学荧光传感器在硫离子检测中的应用。

所述的化学荧光传感器在细胞毒性检测中的应用。

本发明的优点：

(1) 多肽合成原料一般是人体必需的二十种天然氨基酸，因此多肽类传感器不仅水溶性好，生物相容性好，而且毒性小，具有细胞渗透性，可以很好的用于细胞、组织的生物应用研究；

(2) 多肽序列的合成一般采用经典的固相合成方法(SPPS)，方法成熟，易改造，易修饰，合成简单，产率高；

(3) 基于多肽的化学荧光传感器选择性好，灵敏度高干扰小，检测限低。

附图说明