[发明专利]一种中性三七多糖的提取纯化方法及应用

说明书

本发明涉及一种中性三七多糖的提取纯化方法及应用，以三七废渣为原料，采用水提醇沉法，得到三七粗多糖，纯化三七粗多糖，得到中性三七多糖PNPS I及酸性三七多糖PNPS II、PNPS III、PNPS IV、PNPS V洗脱液，冷冻干燥得到5个样品。研究中性三七多糖PNPS I对环磷酰胺致骨髓抑制及免疫低下小鼠的保护作用以及联合化疗对荷瘤小鼠的治疗作用。结果发现只有中性三七多糖PNPS I对7种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用；中性三七多糖PNPS I对环磷酰胺致骨髓抑制及免疫低下小鼠的保护作用；中性三七多糖PNPS I与环磷酰胺联合用药组的抑瘤率比环磷酰胺单独用药组高。中性三七多糖PNPS I可作为治疗骨髓抑制、免疫力低下以及联合化疗治疗肿瘤的新药和功能性保健食品的天然原料。

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种中性三七多糖的提取纯化方法及应用。

背景技术

三七为五加科人参属多年生草本植物，又名参三七、田七等，道地产地为云南文山。三七是我国珍贵的药材，其有效成分包括皂苷、三七素、黄酮、多糖、聚炔醇、氨基酸、脂肪酸和环肽类等。目前对三七有效成分的研究利用主要集中在皂苷成分，皂苷成分提取后，其他有效成分被当作废渣废液被弃去。

目前对三七的研究主要集中在皂苷类有效成分的利用和使用，对其他有效成分的研究不足。三七道地产地云南文山的三七常年种植面积达到了12万亩左右，产量9000吨。每年用于提取三七总皂苷的三七约为1400吨，研究表明，皂苷提取后，三七多糖在三七渣中，测定三七多糖在三七中的含量约为2％，每年弃去三七多糖近30吨。目前对三七多糖的研究报道主要集中在提高免疫功能研究。因此，开发能充分发挥三七多糖功效的产品是非常必要的。

专利申请号为201210058942.6的发明专利公开了一种生理活性的三七多糖的制备方法及其应用。该方法应用水提，水提液上树脂柱层析(纯化用吸附树脂和离子交换树脂包括LSA-8、LSA-21、LSA-30、LSA-10、 LSA-AS、LSA-100、LX-20、LX-68、OU-29、LAR-714、D-101型号的树脂)、纯化水为洗脱液，洗脱液过分子量300-500的超滤膜，浓缩后加乙醇沉淀，将沉淀溶解后喷雾干燥得三七多糖。实验研究：三七多糖增强创伤大鼠免疫功能的作用及三七多糖对小鼠免疫功能的促进作用；三七多糖对动物移植瘤生长的影响；但是该发明中三七多糖的含量低，分别只有68.76％、67.34％和70.24％，没有用到DEAE Sepharose FastFlow 阴离子交换层析柱，没有透析步骤，没有采用冷冻干燥技术。调节免疫作用针对的是创伤大鼠和正常小鼠、抗肿瘤生理活性用的只用三七多糖，没有涉及三七多糖对于肿瘤细胞体外增殖的影响；没有涉及三七多糖对于化药致免疫低下及骨髓抑制小鼠的保护，没有涉及联合化药对肿瘤的治疗作用。

专利申请号为201210481377.4的发明专利公开了一种三七多糖提取物及其制备方法与制剂及应用，所述的三七多糖提取物是以提取三七总皂苷后的废渣为原料经提取、浓缩、精制、干燥、粉碎、检验步骤得到，其中三七多糖含量不低于15％。所述的三七多糖提取物的制备方法包括提取、浓缩、精制、干燥、粉碎、检验步骤，具体包括：将提取三七总皂苷后的废渣加入纯化水提取，过滤，浓缩，加入乙醇沉淀，过滤，精制，干燥得到目标物干燥品；所述的三七多糖提取物加入药用辅料制成散剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂或丸剂；所述的三七多糖提取物用于制备抗肿瘤药物和增强免疫力药物中的应用。但是该发明仅为初步提取，没有进行层析纯化，对于具体应用方面也没有涉及。

专利申请号为CN201710459344.2的发明专利公开了一种中性三七多糖的提取纯化方法及促进细胞增殖药理活性研究与应用，此发明专利也为本发明专利的发明人所申报，中性多糖的提取纯化方法相同，但所涉及的药理活性及应用不同。

目前中性三七多糖的应用主要集中在保健食品方面，其他方面的应用研究较少。

发明内容