[发明专利]成体干细胞冻干粉的制备方法及其在化妆品中的应用

说明书

本发明提供一种成体干细胞冻干粉的制备方法，本发明提供的方法以从人体脂肪或血液提取的成体干细胞为原料，在无血清培养基上进行培养，所述培养基以alpha‑MEM培养基为基础培养基，添加血清替代物、L‑谷氨酸酰胺、核糖核苷、脱氧核糖核苷、成纤维细胞生长因子和转化生长因子‑β，所述无血清培养基安全性能高，细胞培养过程中不易被污染，能够大大缩短成体干细胞的生长周期，提高成体干细胞的增殖速度，促进成体干细胞分泌大量的生长因子，得到的成体干细胞冻干粉纯度高，生物活性高，能够有效修复受损的细胞，促进皮肤细胞的生长和增殖，消除皮肤的皱纹，有效延缓和抵抗衰老。

技术领域

本发明属于生物领域，具体涉及一种成体干细胞冻干粉的制备方法及其在抗衰老化妆品中的应用。

背景技术

爱美是人类的天性，皮肤老化是爱美人士的天敌，皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤，使皮肤对机体的防护能力，调节能力等减退。皮肤的老化表现为皮肤出现小皱纹、弹性下降、皮肤松弛等。皮肤的老化分为内源性的老化和外源性的老化，内源性老化是由遗传因素控制的老化，随着年龄的增长自然老化；外源性老化是环境因素引起的老化，包括日光、机械作用、污染、过度皮肤美容等。皮肤组织的成长期一般结束于25岁左右，此后生长和老化同时存在，皮肤弹力纤维变粗，40-50岁皮肤的老化慢慢明显。人们为了抵抗皮肤老化，延缓皮肤老化的进度，进行了大量的研究，众多的抗衰老护肤品也应用而生，近年来，干细胞在抗衰老化妆品中的应用也成为了研究的热点。但是，市场上美容行业中有些所谓的干细胞针剂，其主要的干细胞来源为从产的胚胎中提取，如果没有经过配型就直接注射胚胎干细胞，容易引起免疫排斥反应、花费巨大，价格较高，需要根据个体的情况进行定制，没有普遍适用性。

发明内容

为了解决以上的技术问题，本发明提供一种成体干细胞冻干粉的制备方法及得到的成体干细胞冻干粉在抗衰老化妆品中的应用，所述制备方法利用无血培养基培养成体干细胞，得到的成体干细胞冻干粉中含有大量的生长因子，能够促进细胞修复，延缓和抵抗衰老。

本发明的目的是提供一种成体干细胞冻干粉的制备方法。

本发明的另一目的是提供一种上述成体干细胞冻干粉的制备方法得到的成体干细胞冻干粉在抗衰老化妆品中的应用。

为了实现上述的发明目的，本发明提供的成体干细胞冻干粉的制备方法，包括以下步骤：

从人体脂肪或血液中提取成体干细胞，在37℃下在无血清培养基上培养至85％以上的细胞融合后传代，收集上清液，过滤，浓缩，冷冻干燥，得到所述成体干细胞冻干粉，所述无血清培养基包括：alpha-MEM培养基，血清替代物，L-谷氨酸酰胺，核糖核苷，脱氧核糖核苷，成纤维细胞生长因子(FGF)和转化生长因子-β(TGF-β)。

本发明利用从人体脂肪或血液中提取的成体干细胞进行无血清培养，在上述培养基中加入血清替代物，L-谷氨酸酰胺，核糖核苷，脱氧核糖核苷，FGF和TGF-β，能够缩短成体干细胞生长周期，提高成体干细胞的增殖速度，促使成体干细胞分泌大量的生长因子，得到的成体干细胞冻干粉中富含生长因子，生长因子是一类通过与特异性的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能的多肽类物质，生长因子能够促进细胞的正常生长与增殖，同时能够修复受损的细胞。本发明提供的成体干细胞冻干粉能够促进表皮细胞再生，抵抗和延缓细胞衰老。同时本发明采用的无血清培养基中不包含动物血清，安全性高，细胞培养过程中不易被污染。优选地，本发明中所述的成纤维细胞生长因子为碱性成纤维细胞生长因子(β-FGF)。

优选地，所述无血清培养基中血清替代物的体积分数为8-10％。

优选地，所述无血清培养基中L-谷氨酸酰胺的浓度为280-300ng/ml，所述核糖核苷的浓度为10-20ng/ml，所述脱氧核糖核苷的浓度为10-20ng/ml，所述成纤维细胞生长因子的浓度为15-25ng/ml，所述转化生长因子-β的浓度为15-25ng/ml。