[发明专利]一种分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法

权利要求书

1.一种分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于制备步骤如下：

a.原料预处理：选择离体的哺乳动物真皮，并进行脱脂、脱毛处理，作为微纤维胶原的原料；

b.离子液体备料：选择配制至少3种质量浓度为5%-95%的离子液体，且所配制的任一离子液体的质量浓度与其它离子液体的质量浓度差绝对值不小于15%，其中离子液体选择纯品极性在ET(30)=50-54kcal/mol范围内且熔点低于0℃的离子液体种类；所述离子液体选择包括1-乙基-3-甲基咪唑二腈胺盐溶液、1-丁基-3-甲基咪唑二腈胺盐溶液、1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐溶液、1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐溶液和1-乙基-3-甲基咪唑三氟乙酸盐溶液中的一种或几种；

c.分步离子液体处理：按照离子液体极性从大到小的顺序，将微纤维胶原的原料依次分步放入上述顺序的离子液体中进行离子液体处理，其中每步离子液体处理分别为将微纤维胶原的原料或上一步离子液体处理所得中间产物浸没入该步所使用的离子液体中，于温度4-15℃下搅拌作用8-16h，作用时间到达后，离心取沉淀并洗涤，作为下一步离子液体处理所使用的中间产物；最后一步离子液体处理为将上一步离子液体处理所得中间产物浸没入最后一步所使用的离子液体中，于温度4-15℃下搅拌作用8-16h，作用时间到达后，离心取沉淀并洗涤后备用；

d.后处理：将分步离子液体处理所得进行包括冷冻干燥、灭菌的后处理，即得微纤维胶原。

2.根据权利要求1所述分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于：所述原料预处理还包括在脱脂、脱毛处理后进行过氧化氢处理。

3.根据权利要求1-2任一项所述分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于所述原料预处理包括以下步骤：

按重量份数计，将1000份离体的哺乳动物真皮加入到5000-6000份异丙醇中，震荡处理10-12h，时间到达后除去异丙醇，然后与1500-1600份水和0.2-0.3份DTM198酶混合，用弱碱调pH至9.0-9.5，搅拌处理30-40min，静置，每静置1小时需搅拌1-2min，总计静置16h后过滤取固体产物，随后将固体产物加入到3000-3500份质量浓度为60g/L的过氧化氢中，作用4-5h。

4.根据权利要求1-2任一项所述分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于：所述微纤维胶原的原料在浸没入离子液体前，是经过清净、以及处理为通径不大于10mm的块状。

5.根据权利要求4所述分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于：所述分步离子液体处理中，随每步离子液体处理，还包括同时将每一步离子液体处理所得中间产物逐步处理减小体积，在进行最后一步离子液体处理前将上一步离子液体处理所得中间产物处理为通径2-3mm的块状。

6.根据权利要求5所述分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于：所述离子液体备料为分别配制下述离子液体：质量浓度为70%的1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐溶液，质量浓度为50%的1-乙基-3-甲基咪唑二腈胺盐溶液，质量浓度为30%的1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐溶液；

所述分步离子液体处理，为将微纤维胶原的原料先浸没入质量浓度为70%的1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐溶液中，于温度4-15℃下搅拌作用15-16h，作用时间到达后，离心取沉淀并洗涤；将洗涤所得浸没入质量浓度为50%的1-乙基-3-甲基咪唑二腈胺盐溶液中，于温度4-15℃下搅拌作用12-13h，作用时间到达后，离心取沉淀并洗涤；然后将洗涤所得浸没入质量浓度为30%的1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐溶液中，于温度4-15℃下搅拌作用9-10h，离心取沉淀并洗涤后备用。

7.根据权利要求6所述分步利用离子液体的梯度极性制备微纤维胶原的方法，其特征在于：所述离心取沉淀并洗涤，还包括在洗涤过程中伴随超声波处理。