[发明专利]一种人类静脉血栓风险基因F5和PAI-1多态性检测试剂盒及其制备方法和应用

权利要求书

1.引物及PNA组，其特征在于，包括：

(1)用于人类静脉血栓风险基因F5多态性检测的引物及PNA组，包括序列如SEQ IDNO.1

所示的正向引物、序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物、序列如SEQ ID NO.3所示且5’端携带VIC荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ ID NO.4所示且5’端携带FAM荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ ID NO.5所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.6所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.7所示的内参正向引物、序列如SEQ IDNO.8所示的内参反向引物、序列如SEQ ID NO.9所示且5’端携带ROX荧光基团的内参鉴定引物、序列如SEQ ID NO.10所示且3’端携带BHQ淬灭基团的内参PNA；

(2)用于人类静脉血栓风险基因PAI-1多态性检测的引物及PNA组，包括序列如SEQ IDNO.11所示的正向引物、序列如SEQ ID NO.12所示的反向引物、序列如SEQ ID NO.13所示且5’端携带VIC荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ ID NO.14所示且5’端携带FAM荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ ID NO.15所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.16所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.7所示的内参正向引物、序列如SEQ IDNO.8所示的内参反向引物、序列如SEQ ID NO.9所示且5’端携带ROX荧光基团的内参鉴定引物、序列如SEQ ID NO.10所示且3’端携带BHQ淬灭基团的内参PNA。

2.一种检测试剂盒，其特征在于，包括检测试剂1、检测试剂2、阳性对照品和阴性对照品；所述检测试剂1包含：序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物、序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物、序列如SEQ ID NO.3所示且5’端携带VIC荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ IDNO.4所示且5’端携带FAM荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ ID NO.5所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.6所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.7所示的内参正向引物、序列如SEQ ID NO.8所示的内参反向引物、序列如SEQ ID NO.9所示且5’端携带ROX荧光基团的内参鉴定引物、序列如SEQ ID NO.10所示且3’端携带BHQ淬灭基团的内参PNA、以及PCR反应液；

所述检测试剂2包括：序列如SEQ ID NO.11所示的正向引物、序列如SEQ ID NO.12所示的反向引物、序列如SEQ ID NO.13所示且5’端携带VIC荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ IDNO.14所示且5’端携带FAM荧光基团的鉴定引物、序列如SEQ ID NO.15所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ ID NO.16所示且3’端携带BHQ淬灭基团的PNA、序列如SEQ IDNO.7所示的内参正向引物、序列如SEQ ID NO.8所示的内参反向引物、序列如SEQ ID NO.9所示且5’端携带ROX荧光基团的内参鉴定引物、序列如SEQ ID NO.10所示且3’端携带BHQ淬灭基团的内参PNA、以及PCR反应液；

所述阳性对照品包含：含F5基因rs6025-G、F5基因rs6025-A、PAI-1基因rs1799762-4G、PAI-1基因rs1799762-5G的重组质粒和含内参基因的重组质粒的混合物；

所述阴性对照为不含内参基因和目的基因位点的重组质粒。