[发明专利]一种基于Janus粒子的电化学免疫传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于Janus粒子的电化学免疫传感器的检测应用，其中以适配体/氨基作为功能化基团制备Janus粒子，并用其修饰玻碳电极表面制得所述电化学免疫传感器，其特征在于：包括如下步骤：

第一步，用50-70%的浓硫酸，20-30%的双氧水，按体积比3-4:1配制piranha溶液，将硅片置于该溶液中，在70-90℃下，加热10-20min，清除硅片表面的杂质，取出，用超纯水冲洗干净，备用；

第二步，按体积比为1:1-1.2的比例，将质量分数为1-2%的氨基PS微球水溶液分散在无水乙醇中，将分散后的PS微球超声20-40s；在培养皿中加入超纯水，将超声处理的PS微球缓慢滴加在超纯水的表面，加入5-10微升十二烷基磺酸钠溶液使PS微球排列为紧密单层，用第一步制备的硅片捞出排列为单层的PS微球，干燥后备用；

第三步，用真空热蒸镀仪在第二步制备的单层排列的PS微球的上表面蒸镀20-30nm的金层后，将其迅速浸入1×10^-3-2×10^-3mol/L赭曲霉适配体溶液中，浸泡12h，用超纯水冲洗硅片，除去吸附松散的赭曲霉适配体；用超声波把修饰好的PS微球从硅片上脱离下来使其分散在pH为7的PBS缓冲液中，制备得到Janus粒子溶液，保存备用；

第四步，将羧基化石墨烯用超纯水制备成0.5mg/ml溶液，超声分散均匀，吸取分散均匀的羧基化石墨烯溶液滴涂在玻碳电极表面，用红外灯烤干，用超纯水轻轻冲洗，除去吸附松散的羧基化石墨烯，得到羧基化石墨烯修饰的玻碳电极；

第五步，将20mg 1-（3-二甲基丙基）-3-乙基碳二亚胺和10mg N-羟基琥珀酰亚胺分别加入1ml第三步得到的Janus粒子溶液中超声30s分散均匀，然后将第四步制备的羧基化石墨烯修饰的玻碳电极浸泡在该溶液中12h后，用红外灯烤干，用超纯水轻轻冲洗，除去吸附松散Janus粒子，得到Janus粒子修饰电极；

第六步，将第五步处理的Janus粒子修饰电极在BSA溶液中浸泡2-4h后取出，用超纯水冲洗，除去表面吸附松散的BSA，吹干，浸入pH为7的PBS缓冲液中，得到所述电化学免疫传感器，备用；

第七步，将第六步制备得到的电化学免疫传感器采用差分脉冲法对红酒中赭曲霉毒素A进行检测。