[发明专利]一种川贝母内生真菌介导纳米银的生物合成方法及应用

说明书

本发明属于生物合成技术领域，公开了一种川贝母内生真菌介导纳米银的生物合成方法及应用，利用川贝母内生真菌浸泡液与硝酸银溶液反应，对分离得到的15株川贝母内生真菌进行初筛后，利用川贝母内生真菌CBY4和CBY13通过生物合成法制备纳米银4‑AgNPs和13‑AgNPs；生物合成过程中，合成条件为：pH3‑11，硝酸银溶液浓度为2mmol/L，2000Lux光照强，50℃。本发明首次发现川贝母中分离的内生真菌CBY4和CBY13具有合成纳米银的能力，优化得到了一个比较适合其纳米银合成的反应条件，同时发现合成的纳米银具有一定的抑菌和抗肿瘤活性。

技术领域

本发明属于生物合成技术领域，尤其涉及一种川贝母内生真菌介导纳米银的生物合成方法及应用。

背景技术

目前，业内常用的现有技术是这样的：

1、内生真菌的分析现状

内生真菌是一类生活于健康植物的组织细胞间或细胞内，且不会造成明显疾病症状的真菌。自1898 年vogl等科学家成功地从黑麦草的种子中分离出第一株内生真菌，120年来，关于内生真菌的分析从未间 断过，目前内生真菌的分析已经覆盖了整个植物界，不管是常见的低等植物如苔藓、地衣等，还是经济价 值高的高等植物如人参、铁皮石斛等。尤其是在1993年，美国蒙大拿州立大学Strobel博士等首次从短 叶红豆杉的韧皮部中分离得到1株能合成新型抗癌物质紫杉醇的内生真菌安德氏紫杉霉Taxomyces andreanae，这项分析结果直接而有力地证明植物内生真菌能够合成与宿主植物相同或相似活性成分。此 后植物内生真菌的分离纯化、菌种鉴定、活性检测逐渐成为分析热点。

1.1内生真菌的多样性

内生真菌广泛存在于整个植物界中，是一个庞大而特殊的真菌类群，相较于其他真菌类群，内生真菌 的分析尚处于起步阶段，学界对内生真菌的种类和数量还知之甚少。最初Hawksworth在估算自然界中真 菌存在的数量时，并没有将内生真菌计算在内。

学者从现已分析过的植物体内都能分离到数量不等的内生真菌，表明内生真菌是普遍存在于植物体内 的，数量从十几种到近百种，还从未出现过没有分离得到内生真菌的现象。田小曼等从菊科植物青蒿的根、 茎、叶三个不同部位中,成功地分离出12株内生真菌。伍等从两个产区的玄参中成功分离得到58株内生 真菌。秦盛等以一种墨西哥仙人掌Opuntiamicrodasys(Lehm.)Pfeiff的肉质茎为材料，从中分离获得31 株内生真菌。李治滢等以药用植物乌头的侧根、茎、叶、花为材料，从这四个不同部位中分离获得164株 内生真菌^[8]。在对内生真菌与宿主进行专一性分析时发现平均每种宿主至少有4-5种专性内生真菌,如果 按地球目前己探明存在的25万种植物计算,则整个植物界内生真菌的总数可以超过100万种。

1.2内生真菌的作用

内生真菌作为一类长期生活在宿主植物体内的真菌类群，在与宿主长期协同进化的过程中形成了特殊 的互惠共生关系。一方面宿主植物可以为内生真菌提供生长所需的营养物质和栖息场所，另一方面内生真 菌也可以合成一些对宿主植物有利的活性成分。因此内生真菌对宿主植物的生长发育和进化演变起到重要 作用。

1.2.1促进宿主植物的生长