[发明专利]巴氏染色试剂盒及其染色方法

说明书

本发明公开一种巴氏染色试剂盒及其染色方法。该试剂盒包括苏木素染液、返蓝液、伊红染液和清洗液。所述伊红染液是由以下浓度的物质配制而成：600‑900ml/L的乙醇、100‑400mL/L的甲醇、1‑4g/L的曙红Y、1‑4g/L的磷钨酸、0.01‑2g/L的固绿、1‑10mL/L的弱酸；所述清洗液是由溶剂油、无水乙醇和丙二醇甲醚醋酸酯按体积比10‑350:600‑950:10‑200混合而得。利用本发明的巴氏染色试剂盒染色快速，并且染色后颜色区别分明，有效地提高了诊断的效率。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，具体涉及巴氏染色试剂盒及其染色方法。

背景技术

巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法，该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。

目前，子宫颈炎、肺结核、胸膜炎、尿路感染等疾病成为我国临床上的常见疾病、多发病，这些疾病的发病率高，治愈时间长，如何诊断这些疾病成为一个研究的热点。液基薄层细胞学技术可辅助临床医生对上述疾病提早发现并制定正确的治疗方案，使患者尽快康复，减少痛苦，因而受到研究人员和临床医生的关注。

液基薄层细胞学技术的重要步骤之一就是对细胞进行染色，而巴氏染色液是最常用的染色方法之一。利用巴氏染色液染色的标本细胞透明度好，结构清晰，制片色彩丰富而鲜艳。

传统的巴氏染色手续繁杂，染色时间较长且难以掌握，并且需要单独透明更是增加了时长和操作步骤。因此，为了提高诊断的效率，亟需研发快速的巴氏染色。

发明内容

为解决上述现有技术问题，本发明提供了一种巴氏染色试剂盒及其染色方法。该巴氏染色试剂盒染色快速，并且染色后颜色区别分明，有效地提高了诊断的效率。

一种巴氏染色试剂盒，该试剂盒包括苏木素染液、返蓝液、伊红染液和清洗液；其中，

所述伊红染液是由以下浓度的物质配制而成：600-900ml/L的乙醇、100-400mL/L的甲醇、1-4g/L的曙红Y、1-4g/L的磷钨酸、0.01-2g/L的固绿、1-10mL/L的弱酸；

所述清洗液是由溶剂油、无水乙醇和丙二醇甲醚醋酸酯按体积比10-350:600-950:10-200混合而得。

在一个优选实施方式中，所述伊红染液是由以下浓度的物质配制而成：700-880mL/L的乙醇、120-300mL/L的甲醇、1.1-2g/L的曙红Y、1.5-3g/L的磷钨酸、0.05-1g/L的固绿、2-8mL/L的弱酸；

所述清洗液是由溶剂油、无水乙醇和丙二醇甲醚醋酸酯按体积比50-250:650-900:50-150混合而得。

在另一个优选实施方式中，伊红染液中，所述弱酸优选无水乙酸、无水碳酸、无水柠檬酸或无水磷酸中的任意一种，更优选地，所述弱酸为无水乙酸。

在另一个优选实施方式中，所述苏木素染液是由以下浓度的物质配制而成：1-4g/L的苏木素、150-400mL/L的醇、10-40g/L的硫酸铝、0.1-4g/L的氧化剂、15-50mL/L的弱酸、余量为水；

更优选地，所述苏木素染液是由以下浓度的物质配制而成：1.5-3g/L的苏木素、200-350mL/L的醇、12-25g/L的硫酸铝、0.12-2g/L的氧化剂、20-40mL/L的弱酸、余量为水。

在另一个优选实施方式中，苏木素染液中，所述醇优选甲醇、乙醇、异丙醇和丙三醇中的一种或多种；所述氧化剂优选氧化汞或碘酸钠；所述弱酸优选乙酸、碳酸、柠檬酸或磷酸中的任意一种，更优选地，所述弱酸为乙酸。

在另一个优选实施方式中，所述返蓝液为碱性溶液。所述碱性溶液包括饱和碳酸锂溶液、Scott促蓝液、氢氧化铵水溶液、Tris溶液。