[发明专利]一株Surfactin高产菌株及其应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，公开了一种高产Surfactin的菌株及其应用。该菌株为枯草芽孢杆菌LM34S07，已于2018年4月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC 15620。利用该菌株生产Surfactin具有合成速率快、产量高的突出优点，可应用于微生物饲料、饲料添加剂、微生物肥料、植物病害防治、食品防腐保鲜、化妆品、医药、环保等领域，具有巨大的应用潜力和经济价值。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种高产Surfactin的枯草芽孢杆菌菌株及其应用。

背景技术

Surfactin，中文名称表面活性素，是由芽孢杆菌属细菌经非核糖体途径合成的次级代谢产物，基本结构是由1个β-羟基脂肪酸和含7个氨基酸的多肽经内酯键连接而成的环状脂肽，因脂肪酸中碳链长度的不同，会出现分子量上相差一个或几个-CH₂的同系物。

Surfactin具有表面活性大、乳化和发泡性能良好的突出特性，能显著降低水的表面张力和其他液-液界面张力；另外，Surfactin还被证实具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗支原体、抗肿瘤等抗微生物活性；同时，由于Surfactin是由脂肪酸、多肽链连接而成的环状脂肽，Surfactin还具有易生物降解、对环境无污染等优异特性。

正因为环脂肽Surfactin具有诸多突出特性，使得Surfactin、产Surfactin的微生物菌株被开发应用于微生物饲料、饲料添加剂、微生物肥料、植物病害防治、食品加工、医药、化妆品、环保、石油开采等多个领域，备受国内外研究人员、工业开发人员等的青睐。

但是，由于现有微生物菌株的Surfactin产率较低，导致Surfactin生产成本较高，Surfactin价格昂贵，大大限制了Surfactin应用范围、规模化生产和商业化开发应用。

发明内容

为了解决目前Surfactin产率低、无法满足工业化生产的问题，本发明提供一种高产Surfactin的菌株、生产方法及其应用。

本发明提供了一株Surfactin高产菌株，该高产菌株为枯草芽孢杆菌LM34S07(Bacillus subtilis LM34S07)，已于2018年4月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC 15620，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

本发明所提供的Surfactin高产菌株枯草芽孢杆菌LM34S07是由出发菌株枯草芽孢杆菌经亚硝基胍、He-Ne激光照射复合诱变选育得到。

枯草芽孢杆菌LM34S07在营养琼脂平板上生长良好，菌落乳白色、不透明，菌落圆形、边缘不整齐；细胞杆状，革兰氏阳性，芽孢中生、椭圆形。

本发明提供的菌株属于是国际上公认的安全菌种，被美国FDA和环保署列为可商业上应用的微生物菌种之一，也是我国农业部规定的免做安全鉴定的一级菌种之一。

本发明提供了利用枯草芽孢杆菌LM34S07生产Surfactin的方法，包括：挑取菌株LM34S07一环，接入装有30-100mL牛肉膏蛋白胨培养基的250mL三角瓶中，于30-35℃、150-200rpm下摇床培养16-24h，得种子液；将种子液按3-10%(v/v)的接种量接入装有100-200mL发酵培养基的500mL三角瓶中，于30-35℃、150-200rpm下摇床培养28-48h，得发酵液；发酵培养基组成为葡萄糖15-35g、谷氨酸3-8g、酵母膏1-4g、磷酸二氢钾0.7-1.1g、氯化钾0.3-0.6g、七水硫酸镁0.3-0.6g、硫酸铜0.1-0.2mg、七水硫酸亚铁0.1-0.2mg、硫酸锰3-10mg、水1L，pH7.0，115℃灭菌30min。

本发明提供了以枯草芽孢杆菌LM34S07或其发酵产物或含有枯草芽孢杆菌LM34S07的菌剂在饲料领域、农业领域的应用。