[发明专利]一种从土曲霉次级代谢产物中分离提取的新化合物LW-1

说明书

本发明公开了一种从土曲霉次级代谢产物中分离提取的新化合物LW‑1，其制备方法包括孢子制备、菌株发酵、次级代谢产物萃取和分离纯化，菌株发酵步骤为：向真菌培养基中添加表观遗传修饰调控剂SAHA、帕立骨化醇、甘油三酯，搅拌均匀，静置，发酵培养。有益效果为：本发明在培养基中添加帕立骨化醇、甘油三酯，与表观遗传修饰调控剂SAHA产生协同增益作用，对土曲霉进行表观修饰，促进其产生多样化的次级代谢产物，从而分离得到一种新的次级代谢产物LW‑1；本发明制得的土曲霉新次级代谢产物LW‑1及其立体异构体或药学上可接触的盐，具有长效抑菌抗炎作用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种从土曲霉次级代谢产物中分离提取的新化合物LW-1。

背景技术

众所周知，微生物早已成为抗生素、酶抑制剂等活性物质的重要来源。微生物由于可以大规模发酵培养，无原料限制，不会破坏环境等优点已成为天然产物研究领域的热点。近年来从陆地微生物中获得新化合物的概率大幅降低，而海洋来源微生物由于其生存环境特异，除可产生与陆地相似的代谢产物之外，有时还会产生一些结构特异的新化合物，显示了巨大的开发利用前景，引起了业内学者的广泛关注。

曲霉属真菌一直以来都是天然产物界研究的重要菌种。土曲霉(Aspergillusterreus)，属于半知菌纲，壳霉目，杯霉科，是黄曲霉群的一种常见腐生真菌，多见于发霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。土曲霉菌落生长较快，结构疏松，表面灰绿色，背面无色或略呈褐色，菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。土曲霉真菌一直以来都是天然产物界研究的重要菌种，其次级代谢产物结构新颖骨架多变，除了常规的甾体、倍半萜、蒽醌等常见结构类型以外，往往还含有：生物碱类，肽类、聚酮类、二倍半萜等多种的骨架。

现有技术如授权公告号为CN 104710396 B的中国发明专利，公开了一种柳珊湖来源真菌次级代谢产物衍生物及其作为抗菌剂的应用。其分离得到的化合物对甲氧西林耐药的金黄色葡球菌(MRSA)、万古霉素耐药的肠球菌(VRE)具有较强的抑制作用，对革兰氏阴性菌有一定的抑制作用，最小抑制浓度MIC均小于12.5μM，表明其可发展为有潜力的抗菌药物，但是该柳珊湖来源真菌次级代谢产物衍生物对革兰氏阴性菌的抑制活性不明显。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从土曲霉次级代谢产物中分离提取的新化合物LW-1，其制备方法是土曲霉经表观遗传修饰调控剂SAHA修饰，产生多样化的次级代谢产物，发酵物分离萃取率高。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

一种从土曲霉次级代谢产物中分离提取的新化合物LW-1，为式I所示的化合物、其立体异构体或药学上可接触的盐，式I具有如下结构：

一种从土曲霉次级代谢产物中分离提取的新化合物LW-1的制备方法，包括孢子制备、菌株发酵、次级代谢产物萃取和分离纯化，具体步骤为：

孢子制备：将置于-80℃超低温冰箱保藏的土曲霉的甘油冻存管置于洁净操作台中，复苏10min，用灼烧灭菌后的接种环蘸取已复苏的冻存液，在新鲜配置的PDA斜面固体培养基中均匀划线，然后，斜面培养基置于28℃恒温培养箱中培养3天，培养菌株斜面至成熟，得丰满孢子，备用；

菌株发酵：向真菌培养基中添加表观遗传修饰调控剂SAHA、帕立骨化醇、甘油三酯，搅拌均匀，静置，发酵培养30天，一共发酵60L；帕立骨化醇、甘油三酯添加到真菌培养基中，可与表观遗传修饰调控剂SAHA协同作用，改变培养基内溶解氧环境，促进菌丝发酵，同时，促进SAHA与菌丝体细胞通路的活性位点结合，促进真菌次级代谢产物的产生和生长，增加菌丝体次级代谢产物的产量和多样性；