[发明专利]生产谷氨酰胺转氨酶的干酪乳杆菌诱变菌及其用途有效
| 申请号: | 201811024020.7 | 申请日: | 2018-09-04 |
| 公开(公告)号: | CN109266572B | 公开(公告)日: | 2021-06-29 |
| 发明(设计)人: | 张胤;李肯;赵聃 | 申请(专利权)人: | 湖南肯基因科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N15/01;C12N9/10;A23L29/269;A23L2/52;A23C9/154;A23L11/45;A23L11/50;A23L11/65;C12R1/245 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 410000 湖南省长沙市岳麓区*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 生产 谷氨酰胺 转氨酶 干酪 杆菌 诱变 及其 用途 | ||
1.一种高产谷氨酰胺转氨酶的干酪乳杆菌诱变菌株(Lactobacillus casei strain)KJY14,保藏号为CGMCC No. 15424,保藏日期为2018年03月07日,保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.通过权利要求1所述的诱变菌株,用于生产谷氨酰胺转氨酶的方法,包括:
(1)将保藏的干酪乳杆菌诱变菌株于豆清液培养液中活化培养;
(2)将活化的培养液,以108CFU/ml的浓度加入预先制备好的豆浆、豆清液或米浆培养液中,于37℃下静置培养5-50h,获得终发酵液;
(3)离心过滤菌液,获得无细菌的上清液;
(4)SDS-PAGE电泳初步验证结果,然后经过硫酸铵沉淀和透析后,并通过SePhadex过柱进行纯化。
3.通过权利要求1所述的干酪乳杆菌,与下列多种其他诱变菌株进行复配,以生产谷氨酰胺转氨酶的方法,步骤包括:
(1)将保藏的干酪乳杆菌和多种其他诱变菌株分别进行活化培养,其中,活化培养基选自MRS液体培养基,其他诱变菌株选自鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、玉米乳杆菌(Lactobacillus zeae strain)、肠膜状明串珠菌(Leuconostocmesenteroidesstrain)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);
(2)将活化的诱变菌株培养液,加入预先制备的豆清液或豆浆培养液中,于37℃下静置培养5-50h,获得终发酵液,其中干酪乳杆菌的加入量为108CFU/ml的浓度,另外4种菌种的加入量为107CFU/ml的浓度;
(3)离心过滤菌液,获得无细菌的上清液;
(4)SDS-PAGE电泳初步验证结果,然后经过硫酸铵沉淀和透析后,并通过SePhadex过柱进行纯化,
其中所述鼠李糖乳杆菌选自鼠李糖乳杆菌KJY11,保藏号为CGMCC No. 15421,保藏日期为2018年03月07日;
所述植物乳杆菌诱变菌株KJY12,保藏号为CGMCCNo. 15422,保藏日期为2018年03月07日;
所述玉米乳杆菌选自玉米乳杆菌KJY13,保藏号为CGMCC No. 15423,保藏日期为2018年03月07日;
所述干酪乳杆菌选自干酪乳杆菌KJY14,保藏号为CGMCC No. 15424,保藏日期为2018年03月07日;
所述肠膜状明串珠菌选自肠膜状明串珠菌KJY15,保藏号为CGMCC No. 15425,保藏日期为2018年03月07日。
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