[发明专利]液体菌种的培植工艺

说明书

本发明公开一种液体菌种的培植工艺，包括以下步骤：a、原料准备；b、培养基制备；c、培养基杀菌；d、发酵罐杀菌；e、接种；f、一段发酵；g、二段发酵；h、三段发酵；i、pH值调节。本发明通过对培养基的选择和处理，保证培养基的营养成分满足液体菌种的需求，同时保证其处于无菌状态；通过对发酵温度、时间和通气量的控制，充分保证发酵的效果。

技术领域

本发明属于食用菌培植技术领域，具体涉及一种液体菌种的培植工艺。

背景技术

2016年国内食用菌产量近3400万吨，占世界食用菌总产量的70%，产值近3000亿元。产值占农业种植业产值的5 .89%，成为仅次于蔬菜、粮食和水果的第四大种植产业。在食用菌的生产中，菌种生产称之为“重中之重”。当前食用菌菌种生产企业多为固体菌种，固体菌种生产时间长，菌龄不一致，成本高。而食用液体菌种是一种在液体培养基中进行培养的菌种，液体菌种生长速度快，可以减少制种时间，提高菌种质量，便于机械化操作。但是液体菌种在发酵结束后常常不能马上接种，需要进行一段时间的保存，而在保存过程中菌种活力往往会下降，造成接种的菌棒萌发缓慢，不利于食用菌的大批量生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题便是针对上述现有技术的不足，提供一种液体菌种的培植工艺，保证培养基的营养成分满足液体菌种的需求，同时保证发酵的效果。

本发明所采用的技术方案是：一种液体菌种的培植工艺，包括以下步骤：

a、原料准备：按照水300g/L-400g/L、富硒玉米粉500g/L-600g/L、酵母粉50g/L-60g/L、磷酸二氢钾15g/L-20g/L、葡萄糖100g/L-200g/L和蛋白胨10g/L-15g/L的标准称取原料备用；

b、培养基制备：将水加热至105℃时，依次放入富硒玉米粉和酵母粉，搅拌10min-15min后加入磷酸二氢钾、葡萄糖和蛋白胨继续搅拌5min-10min后制得培养基备用；

c、培养基杀菌：将制备好的培养基送入蒸锅蒸煮5h-7h，蒸煮温度为110℃-120℃，自然冷却后开启紫外线杀菌灯杀菌40min-50min，杀菌完成后入蒸锅二次蒸煮1h-2h，蒸煮温度为120℃-130℃；

d、发酵罐杀菌：将培养基送入发酵罐内，在130℃-150℃的环境下杀菌1h-2h后自然冷却；

e、接种：在无菌环境下按照8g/L-10g/L的接种量接种菌种；

f、一段发酵：将发酵罐升温至30℃-32℃，在通气量10L/min-12L/min条件下发酵20h-24h，发酵完成后按照10g/L-20g/L的标准加入硫酸镁；

g、二段发酵：将发酵罐升温至24℃-28℃，在通气量8L/min-10L/min条件下发酵12h-15h，发酵完成后按照8g/L-10g/L的标准加入磷酸二氢钾；

h、三段发酵：将发酵罐升温至20℃-24℃，在通气量6L/min-8L/min条件下发酵10h-12h；

i、pH值调节：三段发酵完成后，加入pH值，保证其pH值处于6-8后常温通气培养24h-30h，得到液体菌种。

作为优选，步骤a中，原料为水300g/L、富硒玉米粉500g/L、酵母粉50g/L、磷酸二氢钾、葡萄糖100g/L和蛋白胨10g/L。

作为优选，步骤a中，原料为水350g/L、富硒玉米粉550g/L、酵母粉55g/L、磷酸二氢钾18g/L、葡萄糖150g/L和蛋白胨13g/L。

作为优选，步骤a中，原料为水400g/L、富硒玉米粉600g/L、酵母粉60g/L、磷酸二氢钾20g/L、葡萄糖200g/L和蛋白胨15g/L。