[发明专利]一种MYB家族转录因子基因及其用途

说明书

本发明提供了一种MYB家族的转录因子基因HVUL2H04696，它调控着N‑阿魏酰羟色胺合成的生物途径。本发明还提供了一种转HVUL2H04696的烟草的构建方法，它可以实现不依赖药用植物来实现中药单体羟基肉桂酰酪胺和N‑阿魏酰羟色胺的合成。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种青稞来源的MYB家族转录因子基因的应用。

背景技术

N-阿魏酰羟色胺具有抗炎、抗肿瘤和抑菌的作用，在红花等药用植物中有微量的分布。由于药用资源有限，N-阿魏酰羟色胺的来源需要进一步开发。

青稞，青稞英文名：hulless barley。是禾本科大麦属的一种禾谷类作物，因其内外颖壳分离，籽粒裸露，故又称裸大麦、元麦、米大麦。主要产自中国西藏、青海、四川、云南等地，是藏族人民的主要粮食。

青稞还具有一定的药用价值，而现有技术未见青稞中含有N-阿魏酰羟色胺的报道。

发明内容

本发明通过对青稞的研究，发现了一种新的青稞MYB家族转录因子基因HVLU2H04696，其可以诱导植物体积累N-阿魏酰羟色胺。

本发明提供了一种基因(MYB家族转录因子基因HVLU2H04696)，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明提供了一种重组载体，其特征在于：它包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

本发明提供了一种重组菌，其特征在于：它包含权利要求2所述的重组载体；优选地，所述重组菌为农杆菌EHA105。

本发明提供了一种蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明提供了一种生产N-阿魏酰羟色胺的转基因植物的构建方法，步骤如下：取SEQ ID NO.1所示基因片段，转入植物中，即可。

优选地，步骤为：取前述的HVLU2H04696基因片段，连接入载体，转化细菌，挑单克隆活化，前述细菌活化后转入转染液，转染植物，获得转基因植株，即可。

所述载体为瞬时表达载体pEAQ。

所述细菌为农杆菌EHA105。

所述转染液含有100μM乙酰丁香酮(acetosyringone,AS)。

前述的构建方法，其特征在于：所述植物为烟草。

本发明还提供了前述的基因片段、重组载体、重组菌在制备高产N-阿魏酰羟色胺青稞品种的用途。

本发明的基因片段和重组载体，可以用来提高青稞对N-阿魏酰羟色胺的合成，实现青稞的定向改良。

本发明的转基因烟草构建方法，为青稞的定向改良提供了重要的参考。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为转基因植物提取物的色谱图。

图2为转基因植物提取物中N-阿魏酰羟色胺质谱图。

实施例1基因片段的获得

称取1克青稞新鲜叶片，提取青稞RNA，用Thermo Fisher公司的M-MLV ReverseTranscriptase合成cDNA，设计引物，如下：