[发明专利]一种用于芽孢杆菌的高密度培养方法及培养基在审
| 申请号： | 201811012929.0 | 申请日： | 2018-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109055270A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 唐谢芳;张文;郑雪媚;林万华;黄炜乾;方文棋;吴阳开;刘宗新;蒋顺进;张泳;孟葵开 | 申请（专利权）人： | 广东容大生物股份有限公司;清远一生自然生物研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/07 |
| 代理公司： | 广州胜沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人： | 钟小敏 |
| 地址： | 511500 广东省清远*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 芽孢杆菌 高密度培养 培养基 硫酸铵 生物技术领域 发酵培养基 磷酸二氢钾 磷酸氢二钾 发酵培养 斜面培养 芽孢形成 摇瓶培养 玉米淀粉 玉米芯粉 种子培养 芽孢 蔗糖 蛋白胨 酵母粉 硫酸镁 氯化锌 肠液 鱼类 | ||
1.一种用于芽孢杆菌高密度培养的培养基，其特征在于，包括斜面培养基、种子培养基和发酵培养基；所述发酵培养基由以下组分及其浓度组成：蔗糖8-15g/L，玉米芯粉25-50g/L，蛋白胨15-30g/L，酵母粉15-30g/L，玉米淀粉30-40g/L，硫酸镁0.5-0.9g/L，氯化锌0.1-0.7g/L，磷酸二氢钾0.5-1.3g/L，磷酸氢二钾0.8-1.5g/L，硫酸铵0.03-0.1g/L，鱼类肠液0.1-1g/L。
2.如权利要求1所述的用于芽孢杆菌高密度培养的培养基，其特征在于，所述斜面培养基由以下组分及其浓度组成：马铃薯粉150-180g/L，葡萄糖20-25g/L，琼脂粉25g/L。
3.如权利要求1所述的用于芽孢杆菌高密度培养的培养基，其特征在于，所述种子培养基由以下组分及其浓度组成：蔗糖40-60g/L，蛋白胨15-20g/L，酵母粉15-20g/L，玉米淀粉20-25g/L，硫酸镁0.3-0.8g/L，磷酸二氢钾2-5g/L。
4.一种采用权利要求1所述的用于芽孢杆菌高密度培养的培养基培养芽孢杆菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.将芽孢杆菌接种到斜面培养基中，在温度为25-30℃，pH＝6-7条件下，培养4-9天，制得斜面试管菌种；
S2.将步骤S1制得的斜面试管菌种进行摇瓶培养，在温度为25-30℃，pH＝5-7，搅拌转速为180-200r/min条件下，培养5-6天，得到摇瓶种子培养液；
S3.将步骤S2制得的摇瓶种子培养液移至含有种子培养基的种子罐中进行放大培养，在温度为25-35℃，搅拌转速为200-250r/min，pH＝5-7条件下，培养18h，得到种子培养液；
S4.将步骤S3制得的种子培养液按接种量5-10％接种到装有发酵培养基的发酵罐中发酵，发酵过程中控制pH＝6-7，培养温度控制在30-38℃，搅拌转速控制在110-130r/min，溶氧浓度控制在30％以上，发酵10h，补加相同量的发酵培养基，继续培养10h，重复补加培养操作3-6次，即得。
5.如权利要求4所述的用于芽孢杆菌的高密度培养方法，其特征在于，所述步骤S1所述芽孢杆菌选自枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、左旋乳酸芽孢杆菌或消旋乳酸芽孢杆菌。
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