[发明专利]一种制备血红素铁的方法

权利要求书

1.一种制备血红素铁的方法，其具体步骤为：（1）采集动物血进行抗凝抗氧化处理，离心收集血细胞；（2）对血细胞进行溶血破胞处理，获得血红蛋白；（3）将破胞的血红蛋白进行低pH静态超高压处理后、并用碱性蛋白酶水解血红蛋白，对酶解产物进行低pH脉冲电场处理，充分水解蛋白质，离心获得血红素铁；（4）对离心获得的血红素铁进行洗涤、纯化、干燥获得血红素铁。

2.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（1）中的具体方法为：采集新鲜动物血，采用2g/L的抗坏血酸作为抗氧化剂，添加量为血量的0.05％~0.1％，以及15g/L的柠檬酸三钠作为抗凝剂，添加量为血量的4％；采用4000r/min离心20min，上清液为血浆，离心沉淀物为血细胞。

3.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，所述动物血为猪血。

4.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（2）中对血细胞进行溶血破胞处理具体方法为：将离心处理获得的沉淀物血细胞，以水与血细胞体积比为4:1配置处理液，进行超声破碎，超声功率为100w，超声时间与间歇时间比为1:1，工作时间为20min，使得血细胞溶血破胞得到血红蛋白。

5.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（3）中对破胞的血红蛋白进行低pH静态超高压处理具体方法为：将步骤（2）得到的溶血破胞产物，加入氯化钠，添加量为总体积的0.3％，加入冰醋酸，调节pH=3，在温度为25℃的条件下，使用120MPa静态超高压处理40min。

6.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（3）中

采用碱性蛋白酶水解血红蛋白的具体方法为：将步骤（3）中静态超高压处理获得的样品充分混匀，使用NaHCO₃调节pH至8.5，在温度为55℃的条件下，加入碱性蛋白酶，在酶活力为600U/mL的条件下，酶解处理2h。

7.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（3）中对酶解产物进行低pH脉冲电场处理，充分水解蛋白质的具体步骤为：将步骤（3）酶解处理后的样品混合均匀，利用冰醋酸调节pH为3，采用脉冲信号发生器，在波形为双向方波，电极间距离为1.2cm，脉冲频率为200kHz的脉冲电场下，保持温度为37℃，处理4h。

8.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（3）中低pH脉冲电场处理后，离心获得血红素的具体步骤为：将步骤（3）脉冲电场处理后的样品静置2h，4000r/min离心30min，收集沉淀，上清液为血胎溶液、沉淀为血红素。

9.根据权利要求1所述一种制备血红素铁的方法，其特征在于，步骤（4）中对离心获得的血红素进行洗涤、纯化、干燥获得血红素铁的具体方法为：将步骤（3）所得的离心沉淀物血红素进行洗涤纯化，采用体积比10％的醋酸和30％的乙醇各清洗一遍，然后用清水洗涤至中性，获得血红素铁溶液，然后调整浓度在25％~30％，进行喷雾干燥，血红素铁的喷雾干燥条件为进风温度195~200℃，出风温度为90~95℃，最终获得血红素铁粉产品。