[发明专利]一种中国被毛孢扩大培养基及其培养的中国被毛孢和培养方法

说明书

本发明提供了一种中国被毛孢扩大培养基及其培养的中国被毛孢和培养方法，属于微生物培养技术领域。在本发明中，每1L扩大培养基包括以下含量的组分：8～12g的蚕蛹浸提液、15～25g的葡萄糖、8～12g的蛋白胨、3～8g的酵母粉和0.05～0.2g的维生素B1，水定容至1L。利用本发明提供的扩大培养基培养的中国被毛孢，与天然冬虫夏草成分相比，差异较小，说明本发明培养的中国被毛孢有成为冬虫夏草的替代品的潜质。

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种中国被毛孢扩大培养基及其培养的中国被毛孢和培养方法。

背景技术

冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是一种被人们普遍接受的药用真菌，是鳞翅目蝙蝠蛾属的虫草蝙蝠蛾(Hepialus armoricamus Oberthur)幼虫感染中国被毛孢真菌(Hirsutella sinensis)后，在体内大量繁殖而形成的虫菌复合体。冬虫夏草是我国传统名贵中药，与人参、鹿茸齐名，具有抑制肿瘤细胞生长、调节免疫、促进造血、抗炎抑菌、抗心律失常、抗病毒等作用。

近20年来，国内的一些科研院所相继开展了人工培养和深层发酵培养虫草菌丝体的研究，但虫草真菌保健品大部分停留在利用液体培养菌丝体阶段，利用中国被毛孢菌种发酵方法生产出菌粉，其缺点是操作步骤繁多，不易于大规模生产，菌粉中肾保健作用有效成分较低。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种有助于缩小发酵产物与天然冬虫夏草活性成分差异的中国被毛孢扩大培养基及其培养的中国被毛孢和培养方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种中国被毛孢扩大培养基，每1L扩大培养基包括以下含量的组分：8～12g的蚕蛹浸提液、15～25g的葡萄糖、8～12g的蛋白胨、3～8g的酵母粉和0.05～0.2g的维生素B1，水定容至1L。

优选的，所述蚕蛹浸提液的制备方法包括如下步骤：

(1)将蚕蛹干燥、破碎，得蚕蛹粉；

(2)将所述蚕蛹粉与水混合，90～100℃温度下浸提15～30min，用八层纱布过滤，固液分离，得蚕蛹浸提液和蚕蛹渣。

优选的，所述步骤(2)所述蚕蛹粉的质量与水的体积比为1kg：1.8～2.5L。

本发明提供了一种中国被毛孢的培养方法，包括如下步骤：

(a)将中国被毛孢原始菌种接种至改良固体PDA培养基，活化培养，得活化中国被毛孢菌种；

(b)将所述活化中国被毛孢菌种接种至上述方案所述扩大培养基中，15～18℃扩大培养20～40d，得中国被毛孢液体菌种；

(c)将所述中国被毛孢液体菌种接种至上述方案制备蚕蛹浸提液时产生的蚕蛹渣中，发酵培养，得到中国被毛孢菌粉。

优选的，所述步骤(a)中每1L改良固体PDA培养基包括以下含量的组分：150～250g的马铃薯、15～25g的葡萄糖、8～12g的蛋白胨、3～8g的酵母粉、0.3～0.8g的KH2PO4、0.3～0.8g的MgSO4，8～12g的琼脂，水定容至1L。

优选的，所述步骤(a)中活化培养的温度为15～18℃，活化培养的时间为45～60d。

优选的，按照体积质量比计，所述步骤(c)中中国被毛孢液体菌种的接种量为蚕蛹渣质量的1％～5％；发酵培养的温度为15～20℃，发酵培养的时间为180～270d。

本发明还提供了上述方法制备得到的中国被毛孢菌粉