[发明专利]一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用

权利要求书

1.一种水曲柳种子提取物，其特征在于，包含以下22种组分：

如式S2-1-2所示的Nuzhenide、式S2-2-2所示的Isooleonuezhenide、式S2-4-1所示的Jaspolyoleoside B、式S2-2-3所示的Safghanoside A、式S2-4-2所示的Excelside B、式S3-1所示的Lucidumoside A、式S3-2所示的Safghanoside G、式S3-3所示的Oleopolynuzhenide A、式S2-2-4-1所示的GI-3、式E2-4所示的Jaspolyanoside、式E-5-1所示的(8E)-Ligstroside、式EA-6-3所示的Nicotiflorine、式EA-6-7所示的Oleuricine A、式m-m-6-2所示的Sclerosteroid J、式m-1所示的3β,28-dihydroxyoleana-11,13(18)-diene、式m-3所示的熊果酸、式M-6-2-1所示的秦皮醇、式M-6-2-2所示的茴香内酯、式m-2所示的(+)-8-hydroxypinoresinol、式M-6-89所示的AL072、式M-6-3所示的D-aromadendrane-4β,10α-diol、式E2-1所示的酪醇；

2.如权利要求1所述的水曲柳种子提取物的提取分离方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1，将水曲柳种子制成粉末，用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取三次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并三次提取液并减压浓缩，得浸膏；

S2，将S1中浸膏用水分散溶解，依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，对各萃取剂层减压浓缩，得二氯甲烷萃取混合物、乙酸乙酯萃取混合物、正丁醇萃取混合物；

其中，减压浓缩的条件均为：45℃、－0.1MPa；

S3，将二氯甲烷萃取混合物经100～200目硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得7个馏分，各馏分分别用300～400目硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，分离得到式m-1、m-2、m-3、M-6-2-1、m-m-6-2、M-6-89、M-6-2-2、M-6-3的8种化合物；

S4，将乙酸乙酯萃取混合物用60～100目硅胶以质量比1:1拌样，干燥后上100～200目硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用甲醇冲洗，得7个馏分，各馏分分别用200～300目硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用小孔树脂柱层析，甲醇-水系统洗脱，得式E2-4、E-5-1、EA-6-3、EA-6-7、E2-1的5种化合物；

S5，将正丁醇萃取混合物用聚酰胺树脂柱层析进行富集，得白色固体，用相当于白色固体4/5重量的60～100目硅胶拌样，干燥后干法上100～200目的硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，甲醇冲洗，得7个馏分，各馏分分别经300～400目的硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用小孔树脂柱、硅胶柱中的一种或两种或同种反复使用做层析，得式S2-1-2、S2-2-2、S2-4-1、S2-2-3、S2-4-2、S3-1、S3-2、S3-3、S2-2-4-1的9种化合物；

其中，S5中二氯甲烷-甲醇溶液中两者的体积比为100：1～0：1；小孔树脂柱进行层析时洗脱剂均为甲醇-水溶液，且两者的体积比为1:9～9:1。

3.如权利要求1所述的水曲柳种子提取物在皮肤增白药物、益智健脑药物、降血糖药物方面的应用。

4.如权利要求3所述的水曲柳种子提取物的应用，其特征在于，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、AL072、Lucidumoside A、Sclerosteroid J、熊果酸、Nuzhenide在抑制酪氨酸酶活性上的应用。

5.如权利要求3所述的水曲柳种子提取物的应用，其特征在于，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、AL072、Lucidumoside A、Sclerosteroid J、熊果酸、茴香内酯、Oleuricine A、Nuzhenide、Safghanoside A在抑制乙酰胆碱酯酶活性上的应用。

6.如权利要求3所述的水曲柳种子提取物的应用，其特征在于，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、AL072、Lucidumoside A、Sclerosteroid J、Isooleonuezhenide、茴香内酯、熊果酸、Oleuricine A、Nuzhenide、Safghanoside A在抑制α-葡萄糖苷酶活性上的应用。