[发明专利]一种生防酵母菌活性冻干粉及其制备方法

说明书

本发明涉及一种生防酵母菌活性冻干粉及其制备方法，属于生物防治技术领域；本发明所述的冻干粉中包括季也蒙毕赤酵母（Pichia guilliermondii）Y35‑1、海藻糖、谷胱甘肽；本发明首先取活化后的季也蒙毕赤酵母菌接入NYDB种子培养基培养，再取种子液接入NYTB发酵培养基中发酵；将酵母菌发酵液离心并用无菌水清洗后，所得沉淀用无菌水洗下并制成酵母菌悬液；添加海藻糖及谷胱甘肽作为冻干保护剂后混匀分装在平板中，真空冷冻干燥得到冻干粉；本发明提供的生防酵母菌活性冻干粉的生防效果良好，活性冻干粉复水后的酵母菌悬液处理，油桃果实发病率、果实病斑直径均明显低于对照组，且与之存在显著性差异，可见冻干粉制剂复水后能有效抑制油桃果实的炭疽病腐烂病害。

技术领域

本发明涉及一种生防酵母菌活性冻干粉及其制备方法，属于生物防治技术领域。

背景技术

油桃果实因皮薄，且成熟和采摘在高温高湿的初夏季节，所以在采摘、运销、贮藏过程中极易受到机械损伤和微生物侵害而发生腐烂变质，故造成的经济损失巨大。炭疽病是造成多种果实采后运销和贮藏过程中易发生的主要病害之一，其病原微生物主要是胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）和尖孢炭疽菌（Colletotrichum acutatum）两种。一直以来，对果实病害的控制主要依赖于化学杀菌剂，但随着人们对食品安全和环境保护意识的加强，已更多限制了化学杀菌剂的使用，因此，需要探寻新的更安全、有效的防治方法。

近年来，生物防治已经成为各国关于果蔬采后病害防治的研究热点。其中拮抗酵母菌因为具有遗传稳定、营养要求简单、抑菌谱广、生长快速等特点，以及在多种胁迫环境和逆境下的较强耐受力、对多数化学杀菌剂不敏感、能与一些化学或物理方法结合使用的优点，使其被认定为可作为一种有效代替化学杀菌剂的方法，并应用在水果采后病害的控制方面。新型生防菌剂必须保证成品中有较高数量的活菌，因此需要好的活细胞制剂生产工艺。真空冷冻干燥技术因在低温低压下进行，既能抑制某些细菌的生长，避免杂菌污染，又能使热敏性成分保留下来，而且干制品含水量低，贮藏期长。真空冷冻干燥微生物制品存活率高，且复水性好，现已越来越多的应用于生物制品的干燥过程中。但是能应用于有效控制油桃在采摘、运销、贮藏过程中发生的炭疽病害和腐烂现象的生防菌剂目前报道不多，且防治效率不高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生防酵母菌活性冻干粉及其制备方法，以期应用于有效控制油桃在采摘、运销、贮藏过程中发生的炭疽病害和腐烂现象。

本发明首先提供一种季也蒙毕赤酵母（Pichia guilliermondii）Y35-1，已于2016年12月5日保存于中国典型培养物保藏中心，保藏地址:中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO: M2016719，见附图1。

本发明还提供一种生防酵母菌活性冻干粉，所述冻干粉包括：1×10⁶ ~1×10⁹CFU/mL的季也蒙毕赤酵母（Pichia guilliermondii）Y35-1、2.5~10wt%的海藻糖、0.05~0.2wt%的谷胱甘肽。

优选的，本发明所述的生防酵母菌活性冻干粉包括：1×10⁸CFU/mL季也蒙毕赤酵母（Pichia guilliermondii）Y35-1、5wt%海藻糖、0. 2wt%谷胱甘肽。

本发明还提供一种生防酵母菌活性冻干粉的制备方法，所述方法具体操作如下：