[发明专利]肝用鹅腹脂重与胴体重的辅助选择标记及利用分子标记辅助选择的方法有效
申请号: | 201810988376.6 | 申请日: | 2018-08-28 |
公开(公告)号: | CN109022593B | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 刘龙;耿拓宇;刘同君;赵盼;龚道清 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888 |
代理公司: | 扬州苏中专利事务所(普通合伙) 32222 | 代理人: | 沈志海 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肝用鹅腹脂重 胴体 辅助 选择 标记 利用 分子 方法 | ||
1.一种肝用朗德鹅腹脂重与胴体重的辅助选择标记,具有 SNP位点,SNP位点位于MC5R基因起始密码子下游第807bp位置;SNP位点左右侧核苷酸序列为ATGATCTCCTGCCCTCAAAACCTCTA(C/T)TGTGTTTGCTTCATGTCTC。
2.利用权利要求1所述的辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是,所述方法为:选定待测的朗德鹅个体,抽取血液并提取DNA,利用引物对进行聚合酶链式反应并检测产物,将PCR产物测序并判定基因型,依据基因型挑选在起始密码子下游第807bp位置具有CC基因型个体留作种用;
所述引物对为:
上游引物:5’-ACTCTGGGCATTGTAAGCCT-3’;
下游引物:5’-AGCAGAACAACAAGGTGCAG-3。
3.根据权利要求2所述的利用辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是,所述方法具体为:
1)选定待测的朗德鹅个体:从朗德鹅育种群体中挑选体重均匀的健康个体作为待测个体;
2)抽取血液并提取DNA:从检测个体的翅静脉中抽取血液;利用DNA提取试剂盒,提取DNA模板;
3)聚合酶链式反应及产物检测:利用提取的DNA作PCR中的模板和权利要求2所述的引物对进行PCR;取PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,如呈现912 bp大小的单一条带,则将PCR产物检测;
4)测序并判定基因型:将PCR产物和引物测序,依据测序结果确定基因型;
5)依据基因型挑选合格的个体,凡是在多态性位点具有CC基因型个体都留着种用。
4.根据权利要求3所述的利用辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是, PCR反应体系为20 μL,10µM 上游引物0.5 μL;10µM下游引物0.5 μL;2×Taqmix 10 μL;水8 μL;200ng/μL DNA 1 μL。
5.根据权利要求4所述的利用辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是,所述PCR反应体系中的上述物质在按顺序加入反应管后在台式离心机上以1000转/分钟离心1分钟,使所加物质全部沉于底部,然后放置于PCR仪中进行PCR扩增。
6.根据权利要求3所述的利用辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是, PCR反应条件为:95 ºC预变性5分钟;95 ºC 30秒,58 ºC 30秒,72 ºC 1分钟,35个循环;72 ºC,5分钟;4 ºC,保持至电泳。
7.根据权利要求3所述的利用辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是,步骤3)取5 µLPCR产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳。
8.根据权利要求3所述的利用辅助选择标记选择肝用鹅腹脂重与胴体重性状的方法,其特征是,步骤2)从检测个体的翅静脉中抽取0.1 mL的血液。
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