[发明专利]一种鸭血红细胞SOD的分离纯化方法

权利要求书

1.一种鸭血红细胞SOD的分离纯化方法,其特征在于，包括步骤：

(S1)采集新鲜鸭血，加入5-8％的柠檬酸钠抗凝液，抗凝液与鸭血的体积比为1:5-8，离心收集红细胞；

(S2)用生理盐水洗涤3次以上，每次洗涤后进行离心，然后加入红细胞体积2-3倍的去离子水，搅拌1-2h；

(S3)加入重量比分别为4-5％、0.2-1％的氯化钠和硫酸铜，加压过滤，再将滤液用截留分子量为3000-6000D的中空纤维膜超滤浓缩，得到SOD浓缩液；

(S4)调节PH为5.5-6.5，于55-60℃水浴中加热30-50min,冷却，离心，取上清液，过预先用2-3mmol/L的磷酸缓冲液平衡的阴离子交换层析柱，用5-10mmol/L的磷酸缓冲液洗脱，收集SOD洗脱液，经真空冷冻干燥，得到SOD粉；

所述步骤(S4)还包括，在洗脱液中添加0.1-0.5mol/L的稳定剂，所述稳定剂由维生素、L-组氨酸、L-精氨酸组成；

所述维生素采用质量比为1:1的维生素E和K复配。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，各步骤中，离心处理的时间为15-20min，转速为4500-5500r/min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(S4)中，PH调节剂选自浓度为6-8％的盐酸。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述阴离子交换层析柱为DEAE-SepharoseF.F色谱柱。