[发明专利]栀子油中角鲨烯前处理方法及检测方法

说明书

本发明提供了一种栀子油中角鲨烯前处理方法及检测方法，以一定比例的甲醇、石油醚混合溶剂溶解栀子油，采用超声清洗机将混合溶液充分混匀，将混匀的溶液迅速进行多步温差处理。将多步温差法处理得到的溶液上清液进行过滤处理，将过滤后的上清溶液进行旋转蒸发处理，再用丙酮溶解旋转蒸发得到样品，最后采用高效液相色谱对得到的溶液进行测定。本发明方法操作简单、高效且环保；该方法灵敏度高、重现性好；采用超声处理，样品分散更加均匀；采用多步温差法可以快速缩短样品的处理时间，同时也可以较为温和地处理样品，减少样品的损失。

技术领域

本发明涉及植物油中有效成分检测领域，具体涉及一种栀子油中角鲨烯前处理方法及检测方法。

背景技术

栀子果油是一种从茜草科植物栀子的果食中提取的天然植物油。相对于其他植物油，栀子油含有丰富的不饱和脂肪酸，约占其脂肪酸含量的44%；此外，栀子油还含有丰富的角鲨烯。角鲨烯是一种开链三萜类化合物，最早源于鲨鱼肝脏，作为营养剂可以提高肝功能，同时兼具提升机体免疫力、抗氧化、抗衰老等保健功效，是一种具有高附加值的食用油。

目前，现有的植物油角鲨烯检测多采用国家粮食局发布的行业标准方法（LS/T6120-2017），该方法的实施过程包括皂化反应、反复萃取、多次洗涤、氮吹浓缩等步骤，该检测方法存在一些问题亟待解决：1）操作复杂繁琐：需要控制皂化反应，如果皂化反应不完全，会引入油脂杂质；2）耗费较多时间：皂化反应和多步萃取以及多次洗涤步骤较为耗时；3）造成角鲨烯损失：反复萃取过程会造成角鲨烯损失；4）污染环境且成本较高。

基于上述问题，本发明采用超声方法，利用超声的空化效应能够将样品温和地充分混匀，后续采用多步温差处理法，能够快速、稳定除去样品中的饱和及不饱和脂肪酸，提供了一种省时、简便、有效的检测栀子油中角鲨烯含量的方法。

发明内容

本发明旨在提供一种快速、简便、灵敏度高、重现性好、成本低的栀子油中角鲨烯样品制备及检测方法。

实现本发明的技术方案是：一种栀子油中角鲨烯前处理方法，步骤如下：

（1）将栀子油用混合溶剂溶解，并利用超声混合均匀；

（2）将步骤（1）混合溶液采用多步温度处理，液氮处理样品5-10min，常温处理样品10-20min，4℃处理样品5-10min，-20℃处理样品20min；

（3）将步骤（2）处理后的溶液进行过滤，滤液进行旋转蒸发处理，得到样品；

（4）将步骤（3）的样品利用丙酮复溶，然后过滤，得到角鲨烯处理液。

所述步骤（1）中的混合溶剂为甲醇和石油醚，混合溶剂中甲醇所占体积比为50%-80%，栀子油和混合溶剂按照1：40的料液比（g/ mL）混合。

所述步骤（1）中超声混合的功率为800-1000W，超声时间为2-5min；超声反应的空化作用可以快速地使样品均匀分散在两相中。

所述步骤（3）中采用过滤或离心的方式进行过滤，旋转蒸发的温度为30-60℃，真空度为0.08~0.09MPa，时间为5-10min。

所述步骤（4）中采用0.22μm的滤膜进行过滤。

利用高效液相色谱法对栀子油中角鲨烯含量进行测定。

所述高效液相色谱法的检测条件为：色谱柱为Waters symmetry C18 5µm，流动相为乙腈，流速为2mL/min，柱温度为30±5℃，进样量为10µL，检测波长为195nm。