[发明专利]一种壳-核结构固定化酶及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种壳-核结构固定化酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)蛋白表面的双键修饰：将酶蛋白配制成酶溶液，向酶溶液中添加修饰剂，混匀后，将溶液至于4-30℃下反应2-10h，得到表面双键修饰的酶溶液；其中修饰剂和酶的摩尔比为(5-200)：1；所述修饰剂为丙烯酸钠；

(2)双键修饰酶蛋白的胶囊化：向步骤(1)双键修饰的酶溶液中添加质量比为1-10倍的单体，其中单体与酶的质量比为(1-10)：1；涡旋混匀后，除去溶解氧，然后，依次添加交联剂、引发剂和催化剂，其中交联剂与酶的质量比为(0.1-1)：1、引发剂与酶的质量比为(0.5-1)：1、催化剂与酶的质量比为(1-2)：1；将溶液置于室温下反应1-5h后，透析纯化，得到壳-核结构的固定化酶；

步骤(2)中所述的引发剂为过氧化合物引发剂、偶氮类引发剂或氧化还原引发剂中的一种以上；步骤(2)中所述的催化剂为四甲基乙二胺；

所述单体包括苯乙烯、丙烯酰胺、丙烯酸酯类、甲基丙烯酸酯类、丙烯酸盐类、甲基丙烯酸盐类、吡咯、噻吩、吡啶中的一种以上；

所述交联剂包括二异氰酸酯、丙二胺、N,N-亚甲基双丙烯酰胺、二乙烯基苯和乙烯基三乙氧基硅烷中的一种以上。

2.根据权利要求1所述的一种壳-核结构固定化酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的酶蛋白其底物的分子量小于1000，所述的酶蛋白包括脂肪酶、漆酶、甲酸脱氢酶、甲醛脱氢酶、甲醇脱氢酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖异构酶、过氧化氢酶、辣根过氧化物酶、有机磷水解酶中的一种或构成级联反应的两种以上的酶。

3.根据权利要求1或2所述的一种壳-核结构固定化酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的酶溶液浓度为1-10mg/mL。

4.一种壳-核结构的固定化酶，其特征在于，其由权利要求1至3任一项所述的一种壳-核结构固定化酶的制备方法制得，该固定化酶结构中，酶蛋白作为“核”，酶蛋白表面形成的高分子聚合物为“壳”。

5.权利要求4所述的壳-核结构的固定化酶在催化领域或蛋白药物靶向输送领域中的应用。