[发明专利]一种血管内皮生长因子165激活剂及在干细胞中的应用

说明书

本发明涉及一种血管内皮生长因子165激活剂及在干细胞中的应用。碱性磷酸酶(ALP)为早期成骨标志，主要分布于细胞膜，促进细胞钙化，ALP的定量检测可以反映成骨细胞的分化水平，其活性越高，说明前成骨细胞向成熟的成骨细胞分化的越明显。ALP活性的高表达是成骨细胞分化成熟的早期标志，ALP活性增强时，骨形成增强，并促进骨基质矿化形成，故ALP的活性是反映成骨细胞分化程度和功能状态的良好指标。待测化合物1～3通过激活hBMSCs中BMP‑2蛋白表达促进hBMSCs成骨分化，待测化合物4、5通过激活hBMSCs中VEGF‑165蛋白表达促进hBMSCs成骨分化。

技术领域

本发明涉及干细胞领域，尤其涉及干细胞成骨分化。

背景技术

巨大骨缺损一直是临床上常见的难题，骨移植是其主要治疗方法，但存在感染、免疫排斥等诸多缺点。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)具有多向分化潜能，可在不同诱导条件下向成骨细胞、成软骨细胞、神经细胞等细胞分化，由于其提取方便、增殖活跃、低免疫原性以及能向成骨细胞分化，无疑成为理想的组织工程种子细胞。

骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2，BMP-2)是一种多功能蛋白，可以诱导新骨形成和骨折愈合，在胚胎发育过程中调节干细胞增殖分化方面有着重要的作用，且在体外能够诱导干细胞成骨和成软骨分化。

VEGF是目前认为成血管性能最强的因子，它在成骨过程中也是一个不可缺少的因子。VEGF常见有VEGF-121、145、206、189、165这5种异构体，其中VEGF-165以其含量最多、生物作用性最强而被广泛研究。VEGF-165可以增加血管的通透性，更利于骨形成区域各类养分、因子及修复细胞的渗透并发挥作用；VEGF-165可直接作用于血管内皮细胞，促进其分裂同时抑制其凋亡；它又能促进新的血管形成，使无血管区域的组织工程骨产生新的血管；它也能促进BMSCs向成骨细胞分化。

以BMP-2或VEGF-165为靶标筛选BMSCs成骨分化促进剂是公认可行的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血管内皮生长因子165激活剂及在干细胞中的应用。

为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

异淡红乳菇素用作血管内皮生长因子165激活剂的用途。

异淡红乳菇素用于制备促进间充质干细胞成骨分化的药物的用途。

进一步地，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞。

碱性磷酸酶(ALP)为早期成骨标志，主要分布于细胞膜，促进细胞钙化，ALP的定量检测可以反映成骨细胞的分化水平，其活性越高，说明前成骨细胞向成熟的成骨细胞分化的越明显。ALP活性的高表达是成骨细胞分化成熟的早期标志，ALP活性增强时，骨形成增强，并促进骨基质矿化形成，故ALP的活性是反映成骨细胞分化程度和功能状态的良好指标。待测化合物1～3通过激活hBMSCs中BMP-2蛋白表达促进hBMSCs成骨分化，待测化合物4、5通过激活hBMSCs中VEGF-165蛋白表达促进hBMSCs成骨分化。

附图说明

图1是待测化合物的化学结构式。

图2是待测化合物1～3对hBMSCs中BMP-2蛋白表达水平的影响。

图3是待测化合物4～6对hBMSCs中VEGF-165蛋白表达水平的影响。

图4是各化合物对hBMSCs中ALP活性的影响。

具体实施方式

一、实验材料