[发明专利]一种脐带间充质干细胞运输保护液及其保护方法

权利要求书

1.一种脐带间充质干细胞运输保护液，其特征在于，所述运输保护液含有以体积百分比计的以下组分：

其中，所述复方氨基酸原液的组分为每升原液含：精氨酸盐酸盐2.89g、组氨酸盐酸盐2.46g、亮氨酸3.795g、异亮氨酸1.70g、赖氨酸盐酸盐3.33g、苯丙氨酸2.83g、苏氨酸1.97g、缬氨酸1.36g、蛋氨酸1.06g、色氨酸0.39g、甘氨酸3.24g、丙氨酸1.88g、脯氨酸1.00g、酪氨酸0.11g、丝氨酸0.67g、盐酸半胱氨酸0.44g、门冬氨酸1.15g、谷氨酸1.97g、亚硫酸氢钠0.50g、木糖醇50.0g。

2.如权利要求1所述的脐带间充质干细胞运输保护液，其特征在于，各原液均为注射级别的水溶液。

3.如权利要求1所述的脐带间充质干细胞运输保护液，其特征在于，所述运输保护液中脐带间充质干细胞的浓度为2×10⁵-8×10⁵个/mL。

4.一种脐带间充质干细胞运输保护方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

①将脐带间充质干细胞的细胞悬液以700-900rpm的转速离心4-6分钟，吸弃上清液，加入一定量如权利要求1所述的脐带间充质干细胞运输保护液，反复吹打，制得活细胞浓度为2×10⁵-8×10⁵个/mL的细胞悬液；

②将调整后的含有脐带间充质干细胞的所述脐带间充质干细胞运输保护液进行封装保存并运输，运输中的保存温度为2-8℃。

5.如权利要求4所述的脐带间充质干细胞运输保护方法，其特征在于，步骤①中，将活细胞浓度调整为2×10⁵-8×10⁵个/mL的具体方法为：吸取少量细胞悬液，用以进行细胞计数和细胞活力检测，舍弃死细胞，计数活细胞，若活细胞浓度为2×10⁵-8×10⁵个/mL，则调整完成，否则再加入所述运输保护液进行细胞数调整。

6.如权利要求4所述的脐带间充质干细胞运输保护方法，其特征在于，步骤①中所述细胞计数和细胞活力检测是将细胞悬液和0.4％的台盼兰溶液按1:1混合，混匀1分钟后，在显微镜下用血球计数板计数细胞。

7.如权利要求4所述的脐带间充质干细胞运输保护方法，其特征在于，步骤①中离心转速为800rpm，离心时间为5分钟。

8.如权利要求4所述的脐带间充质干细胞运输保护方法，其特征在于，步骤②中的保存环境为避光，保存时间为不超过12小时。

9.如权利要求4所述的脐带间充质干细胞运输保护方法，其特征在于，还包括步骤：

1)从培养有第3-5代脐带间充质干细胞的培养瓶中吸弃原有培养基；

2)用磷酸缓冲液清洗培养的脐带间充质干细胞，并吸弃洗液；

3)加入胰酶-EDTA，37℃孵育2-3分钟，在倒置显微镜下观察细胞，直至脐带间充质干细胞完全消化下来，加入含血清的培养基终止消化；

4)加入磷酸缓冲液，反复吹打，制得细胞悬液。