[发明专利]一种壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒及其制备和应用

说明书

本发明涉及一种壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒及其制备和应用，透明质酸修饰的壳聚糖接枝聚二(乙二醇)甲基醚甲基丙烯酸甲酯PDEGMA纳米颗粒作为载体，负载药物。本发明制备方法操作简单、实验条件易控制；得到的载药纳米颗粒能够长效缓释，且具有pH和温度敏感型输送，在较低pH值和较高温度环境下释放率高，适合肿瘤组织的微环境，具有应用其做后续相关实验分析的潜力。

技术领域

本发明属于载药纳米颗粒及其制备和应用领域，特别涉及一种壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒及其制备和应用。

背景技术

紫杉醇(PTX)是一种从短叶红豆杉中提取的萜类复杂的次生代谢物，是一种广谱高效的抗肿瘤药物，它在细胞分裂过程中通过稳定微管并抑制它们的解聚发挥作用，导致肿瘤细胞的凋亡，从而达到抗癌作用。大多数抗肿瘤药物都表现出高剂量引起的细胞毒性以及特异性和靶向性力不足引起的副作用。其中，最不利的一点是，静脉注射PTX不仅对病变部位细胞有杀伤能力，而且对正常组织的毒性是不能避免的，因此，选择合适的药物载体，对于这种抗肿瘤药物的临床应用尤为关键。具体来说，与传统药物相比，纳米药物传递系统能够表现出被动/主动的肿瘤位点靶向性和持续且智能的药物释放特点。

值得注意的是，肿瘤位置的微环境比正常组织的温度稍微高些(1～2℃高于正常组织)，偏酸性pH值(略低于正常组织)和伴随着高酶浓度的过度细胞增殖，这些都会减弱细胞毒性药物的治疗效果。而根据这些特点可以合成一些温度或pH响应性的药物传递载体，通常被称为“智能纳米载体”，因为它们能够在肿瘤位置经历快速、突然和可逆的结构/属性改变，以应对周围环境的微小变化。利用壳聚糖(CS)接枝聚二(乙二醇)甲基醚甲基丙烯酸甲酯(PDEGMA)的方法，可以合成具有pH值和温度响应特性的药物载体，实现了肿瘤位置微环境双响应功能。

然而，作为乳腺癌治疗的多功能药物载体，需要对纳米颗粒的肿瘤主动靶向性做进一步的改进。肿瘤部位的透明质酸细胞外基质的重要成分是一种天然多糖，具有很强的亲水性能，有很好的生物相容性和生物降解性(在肿瘤部位高表达的透明质酸酶可以将其降解)且不会引起机体免疫反应。透明质酸可以特异性的结合细胞表面的CD44，很多研究表明肿瘤细胞表面CD44比正常细胞约高表达4-5倍，因此将透明质酸修饰在药物递送系统的表面将提高其靶向性能，并负载上模型药物PTX，应用于乳腺癌治疗中具有良好的研究前景。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒及其制备和应用，克服现有技术不具备环境双响应功能及特异性的缺陷。该方法制备方法操作简单、实验条件易控制；得到的载药纳米颗粒能够长效缓释，且具有pH和温度敏感型输送，在较低pH值和较高温度环境下释放率高，适合肿瘤组织的微环境，壳聚糖接枝聚合物纳米颗粒平均粒径在180nm能最大程度到达肿瘤部位。

本发明的一种壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒，所述纳米颗粒为透明质酸修饰的壳聚糖接枝聚二(乙二醇)甲基醚甲基丙烯酸甲酯PDEGMA。

所述纳米颗粒的载药为紫杉醇PTX。

本发明的一种所述的壳聚糖接枝聚合物载药纳米颗粒的制备方法，步骤包括：

(1)将壳聚糖接枝聚合物CS-g-PDEGMA溶液加入透明质酸HA溶液中，搅拌，透析，冷冻干燥，得到透明质酸修饰的壳聚糖接枝聚合物纳米颗粒HA-CS-g-PDEGMA；其中HA和CS-g-PDEGMA的质量比为1：2～10；

(2)将药物溶液滴加入搅拌的HA-CS-g-PDEGMA水溶液中，搅拌反应24～48h，透析纯化后冷冻干燥，即得；其中HA-CS-g-PDEGMA纳米颗粒与药物的质量比为1:0.05～1:0.1。

上述制备方法的优选方式如下：

所述步骤(1)中壳聚糖接枝聚合物CS-g-PDEGMA的具体制备为：