[发明专利]一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法

权利要求书

1.一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1)荔枝多酚氧化酶的提取：称取新鲜荔枝皮，加入缓冲液，捣碎后过滤，保留滤液；向滤渣中加入缓冲液，搅拌，过滤，保留滤液；合并两次滤液，然后离心，取上清液即得荔枝多酚氧化酶液；

S2)茶黄素-3-没食子酸酯粗品溶液的制备：称取表没食子儿茶素没食子酸酯与表儿茶素，加入缓冲液溶解充分，然后加入步骤S1)所述荔枝多酚氧化酶液以及过氧化氢溶液，搅拌反应，过滤，保留滤液，即为茶黄素-3-没食子酸酯粗品溶液；

S3)茶黄素-3-没食子酸酯粗品的纯化：将步骤2)得到的所述茶黄素-3-没食子酸酯粗品溶液作为柱层析上样液逐渐加入已经装有大孔吸附树脂的层析柱内，上样结束后先用水溶液洗脱，然后再用醇溶液洗脱，并收集醇溶液洗脱液，将收集的所述醇溶液洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥即得到茶黄素-3-没食子酸酯。

2.根据权利要求1所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S1)中每次加入的所述缓冲溶液以新鲜荔枝皮质量计为0.1～5mL/g，所述缓冲液加入时的温度控制在0～30℃范围内，所述搅拌时间为2～30min，所述离心时间为2～30min。

3.根据权利要求2所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S1)中每次加入的所述缓冲溶液以新鲜荔枝皮质量计为1～2mL/g，所述缓冲液加入时的温度控制在4～10℃范围内。

4.根据权利要求1所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S2)中所述表没食子儿茶素没食子酸酯与碳酸乙烯酯的重量比为1:0.1-10；

所述表没食子儿茶素没食子酸酯和碳酸乙烯酯总加入量与新鲜荔枝皮的重量比为1：10-100；

所述缓冲液的体积用量以新鲜荔枝皮质量计为5～200mL/g；

所述过氧化氢溶液与缓冲液的体积比为1：100-500；

所述搅拌反应温度为0～40℃，搅拌反应时间为0.5～3h。

5.根据权利要求4所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S2)中表没食子儿茶素没食子酸酯与碳酸乙烯酯的重量比为1:0.25～2；

所述表没食子儿茶素没食子酸酯和碳酸乙烯酯总加入量与新鲜荔枝皮的重量比为1：20-60；

所述缓冲液的体积用量以新鲜荔枝皮质量计为5～20mL/g。

6.根据权利要求1-5任一项所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S1)和S2)中所述缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠或磷酸-磷酸钠的混合溶液。

7.根据权利要求1所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S3)上样流速为每小时0.5～3倍柱体积；

洗脱流速为每小时1～4倍柱体积；

水洗脱体积为0.5～2倍柱体积，醇溶液洗脱体积为2～12倍柱体积。

8.根据权利要求7所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S3)所述醇溶液为甲醇或者乙醇与水的混合溶液，混合后醇所占体积比例为10～40％(v:v)。

9.根据权利要求8所述的一种茶黄素-3-没食子酸酯的制备方法，其特征在于，步骤S3)中所述大孔吸附树脂型号为HPD-100、HPD-200或HPD-400。