[发明专利]一种香芋茎尖快繁脱毒的方法在审
申请号: | 201810963710.2 | 申请日: | 2018-08-23 |
公开(公告)号: | CN109169269A | 公开(公告)日: | 2019-01-11 |
发明(设计)人: | 李倩;杨建国;汪端华;皮向红 | 申请(专利权)人: | 湖南省蔬菜研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 长沙明新专利代理事务所(普通合伙) 43222 | 代理人: | 叶舟 |
地址: | 410125 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 顶芽 脱毒 香芋 茎尖 快繁 培养基 备用 消毒 内吸性杀菌剂 植物生长激素 工厂化生产 脱毒组培苗 无菌水冲洗 细胞分裂素 混合基质 技术支持 酒精处理 升汞处理 植株 分阶段 解剖镜 杀菌剂 外植体 匍匐茎 灭菌 植体 种茎 组培 激素 浇灌 剥离 繁殖 筛选 | ||
1.一种香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)外植体的选择与消毒:所述外植体包括顶芽或者茎尖,
所述顶芽消毒方式为:选取健壮的匍匐茎或植株个体,将取得的材料种在混合基质中,用内吸性杀菌剂进行浇灌,10-30天后取顶芽,用75%酒精处理10S,再用10%升汞处理20min,然后用无菌水冲洗3-4次,得到备用顶芽;
所述茎尖的消毒方法为:将上述消毒后的顶芽在超净工作台上的解剖镜下进行顶芽剥离,得到备用茎尖;
(2)培养基的筛选:采用MS培养基:pH5.8,琼脂粉用量6.5g/L,蔗糖30g/L,活性炭1.5g/L,添加细胞分裂素,植物生长激素和杀菌剂;
所述顶芽培养基为:MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+山农1号1mL/L;
所述茎尖初代培养基为:MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.1mg/L+山农1号1mL/L;
所述茎尖继代培养基为:MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.5mg/L+山农1号1mL/L。
2.根据权利要求1所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的混合基质,按质量比计算,由珍珠岩5份、育苗基质3份、细沙1份组成。
3.根据权利要求2所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的混合基质,三种基质按层堆放,不进行混合。
4.根据权利要求2或3所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的混合基质,沙子置于最上层。
5.根据权利要求1所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的杀菌剂为800倍的多菌灵。
6.根据权利要求1所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的外植体在混合基质中培养20天取顶芽。
7.根据权利要求1所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,步骤(2)中所述顶芽培养基为:MS+6-BA3.0-4.0mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+山农1号1mL/L。
8.根据权利要求7所述的香芋茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述顶芽培养基为:MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.5mg/L+山农1号1mL/L。
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