[发明专利]一种基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法

权利要求书

1.一种基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：包括，

细胞培养：所述细胞能够表达色氨酸羟化酶1并分泌5-羟色氨酸，其中，所述细胞包括大鼠胰岛瘤细胞RIN14B；

所述细胞用牛血清白蛋白和氟西汀处理后与益生菌共孵育，与益生菌共同孵育后的所述细胞分泌的5-羟色氨酸和细胞中色氨酸羟化酶1的mRNA水平的检测，筛选具有抗抑郁功能的益生菌。

2.根据权利要求1所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：所述细胞培养，其中，细胞培养基包括RPMI1640培养基。

3.根据权利要求1或2所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：所述益生菌，包括双歧杆菌属、乳杆菌属、链球菌属、乳球菌属、明串珠菌属、丙酸杆菌属、片球菌属、芽孢杆菌属。

4.根据权利要求1或2所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：所述筛选具有通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌，包括，将传代细胞以10⁵～10⁶ /mL接种于24孔板，用含有0.1％牛血清白蛋白和1-4μmol/L氟西汀的Hank 's平衡盐溶液清洗细胞，后加入含有不同益生菌的HBSS悬液，益生菌的浓度调整到10⁷-10⁹ cfu/mL，37℃孵育20min后，收集悬液，5000～6000g离心5～10min去除沉淀，取上清液待测。

5.根据权利要求1所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：将所述细胞5-羟色氨酸的分泌量提高10倍以上的益生菌菌株作为筛选的有效菌株。

6.根据权利要求5所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：所述5-羟色氨酸的分泌量采用荧光高效液相色谱进行检测分析。

7.根据权利要求1所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：将色氨酸羟化酶1的mRNA提高50％以上的益生菌菌株作为有效菌株。

8.根据权利要求7所述的基于细胞水平筛选通过5-羟色氨酸相关途径实现抗抑郁功能的益生菌的方法，其特征在于：所述色氨酸羟化酶1的mRNA水平用qPCR进行检测。