[发明专利]一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白及其应用

说明书

本发明涉及一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白及其应用，通过将大量慢性阻塞性肺疾病患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ的突变蛋白，根据该人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为慢性阻塞性肺疾病的基因诊断提供指引作用，并为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。

技术领域

本发明涉及一种基因工程领域，尤其涉及一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白及其应用。

背景技术

细胞色素C氧化酶(cytochrome c oxidase)在细胞呼吸中处于细胞色素系统的末端，是把呼吸底物的电子经过细胞色素系统直接传递给分子态氧，即具有自动氧化作用。细胞色素C氧化酶亚基I(cytochrome c oxidase subunit I,COXⅠ)是细胞色素C氧化酶具有酶催化活性的3个亚基之一。

人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ发生突变会对人类健康造成严重影响。在对某些慢性阻塞性肺疾病患者的外周血进行基因测序的过程中，均发现患者的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ发生了突变，因此，对人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变的检测对判断人体是否患有相关疾病具有一定的指引作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白及其应用。

本发明技术方案包括：

第一方面，提供一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白，其氨基酸序列如SEQID NO:1所示。

第二方面，提供一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一种基因芯片，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据上述所述人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白的核苷酸序列，与人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。

优选地，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列；

或，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:4所示的碱基序列；

或，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:5所示的碱基序列。

第四方面，提供一种试剂，所述试剂中含有用于检测上述人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白的引物对。

优选地，其所述引物对包括下述任一上游引物与下述任一下游引物的组合：

上游引物为如SEQ ID NO:8～NO:17中任一所示的碱基序列；

下游引物为如SEQ ID NO:18～NO:37中任一所示的碱基序列。

第五方面，提供一种特异性识别人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白的单克隆抗体，由上述试剂制备而成，其可与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特异性结合。

第六方面，提供一种用于检测人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括：包被有上述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ蛋白、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。

优选地，所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。

本发明提供了一种人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白及其应用，将大量慢性阻塞性肺疾病患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ的突变蛋白，根据该人的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为慢性阻塞性肺疾病的基因诊断提供指引作用，为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。