[发明专利]抗金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP的抗体IgG及应用

说明书

抗金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP的抗体IgG及应用。该抗体能够特异性结合富丝氨酸重复蛋白L‑Lectin模序，通过结合金葡菌表面锚定蛋白SraP，从而降低金葡菌对细胞的粘附和侵入以及在小鼠血液中细菌的数量，可以作为抗金葡菌感染抗体治疗干预的作用靶点。

技术领域

本发明涉及金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP基因克隆、鼠源单抗制备技术，以及所述单抗在金黄色葡萄球菌感染治疗、预防性药物中的应用。

背景技术

富丝氨酸重复蛋白（Serine-rich repeat proteins, SRRPs）自从1998年在副血链球菌（Streptococcus parasanguinis FW213）中首次被发现以来，SRRPs又在其它链球菌、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)等中被发现。目前已知，SRRPs是一类位于革兰氏阳性菌细胞表面，能够介导细菌与细菌之间或者宿主细胞间粘附的糖蛋白。SRRPs不仅能够介导细菌种内的粘附，还可以介导种间的粘附，通过形成生物膜使细菌能够在宿主细胞上定植，进而发展成感染，如亚急性细菌性心内膜炎、口腔感染，肺炎及脑膜炎等。因此，SRRPs 可以作为药物干预或者新型保护性抗原靶标。

金黄色葡萄球菌（S.aureus）是危害人类健康的重要病原菌之一，广泛存在于人的呼吸道和皮肤上，能够引起黏膜、皮肤感染、感染性心内膜炎或全身严重性感染如败血症等。SraP （serine-rich adhesion for platelets）是金葡菌中的SRR蛋白，SraP不仅可以和野生型的细菌结合而且可以和缺失型的细菌结合，不仅参与金葡菌生物膜的形成，还可以介导细菌种间的粘附。SraP非重复区可以与血小板结合，能够与唾液凝集素蛋白gp340结合，gp340作为一种糖蛋白，在唾液、小肠及肺中表达。SraP主要是与gp340的三糖组份NeuAcα (2-3)Galβ(1-4)GlcNAc结合。晶体结构显示，SraP的配体结合区主要是由β-片组成，可以分成四个亚结构域：L-Lectin模块，β-GF以及CDHL-1和CDHL-2模块， SraP_BR与A₅₄₉细胞的粘附主要是通过其L-Lectin模序与Neu5Ac结合介导金葡菌对上皮细胞的粘附和侵入。由此说明SraP_BR中L-lectin模序在与底物结合的过程中起着主要作用，L-lectin、CDHL-1和CDHL-2模块均含有钙离子，主要是起着稳定蛋白整体结构的作用。SraP_BR通过L-lectin模序与宿主细胞（如血小板）表面的Neu5Ac结合，可能是引起金葡菌内腔感染的主要原因。因此SraP的L-Lectin模序作为金葡菌的一个重要的毒力因子可以作为防控金葡菌感染的潜在药物或疫苗开发靶点。