[发明专利]免疫细胞培养基与其应用

说明书

本发明公开了一种免疫细胞培养基，其包含无水氯化钙等多种无机盐、L‑亮氨酸等多种氨基酸、白介素2、白介素4等组分。本发明的免疫细胞培养基在培养CAR‑T细胞时，能够显著提高细胞的增殖倍数，大幅延长细胞培养天数，并能够有效的保持表达表面标志物，同时其还具有保质期长，易于制备等优点。

技术领域

本发明涉及一种免疫细胞培养基与其在培养CAR-T细胞中的应用，属于生物医疗技术领域。

背景技术

以嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，CAR)修饰的T细胞为代表的肿瘤靶向免疫治疗在体外和临床试验中表现出良好的靶向性、杀伤性和持久性，展示了巨大的应用潜力和发展前景。CAR-T细胞治疗的原理在于经嵌合抗原受体修饰的T细胞，可以特异性地识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性均较常规应用的免疫细胞高，并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境并打破宿主免疫耐受状态，即表达CAR的T细胞以抗原依赖、非MHC限制的方式结合肿瘤抗原，启动并活化特异性杀伤肿瘤反应。

CAR-T细胞治疗的一个重要环节是进行CAR-T细胞的扩增，而此环节中的一个非常关键的因素是选择有效的培养基。

迄今，有众多厂家发展了多种免疫细胞培养基，例如，如X-VIVO(Lonza出品)，KBM-551K、KBM-581、LONZA X-VIVO 15培养基(康宁出品)等。这些培养基产品目前已经被广泛的使用。但是，这些培养基都含有动物源成分，例如胎牛血清，这些动物源成分系从动物血清或组织中分离纯化出，可能含有动物病原体，因此有引起疾病的危险。

尽管如Gibco公司的AIM-V、Sigma公司的Stemline、Takara公司的GT-T551H3、Miltenyi公司的TexMACS等产品均声称是无血清培养基，但其在使用时，若非添加血清成分，则淋巴细胞的增殖较为缓慢，难以满足临床细胞治疗所需要的细胞数量。

此外，现有的免疫细胞培养基还存在保质期较短的缺陷，在培养CAR-T细胞的周期内，会在后期导致细胞增殖效率急剧下滑的问题。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种免疫细胞培养基与其应用，以克服现有技术中的不足。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：