[发明专利]一种鹅星状病毒卵黄抗体的制备及其应用

说明书

本发明提供一种使用新型鹅星状病毒制备的卵黄抗体，本发明的卵黄抗体，是用保藏编号为CCTCC No：V201820的新型鹅星状病毒GD 0122株制备的灭活疫苗作为抗原制备的。本发明所制备的抗体，安全性良好，接种雏鹅后，未出现因注射抗体引起的任何局部和全身不良反应。采用抗体效价测定和攻毒保护试验对制备的抗体进行评价，结果显示：本发明中制备的抗体琼扩抗体效价均不低于1：16，注射抗体后雏鹅能够抵御强毒的攻击，说明本发明制备的抗体对鹅群能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。

技术领域

本发明属于免疫制品技术领域，具体涉及一种使用鹅星状病毒制备的卵黄抗体。

技术背景

痛风亦称尿酸盐沉积，肾病综合征，是由于体内尿酸产生过多或排泄障碍，造成体内大量尿酸蓄积，并以尿酸盐的形式沉积在关节、内脏器官浆膜面及其他组织间质，从而引起患禽运动迟缓、排白色稀粪、厌食、衰竭，甚至死亡，是特殊种类的蛋白质代谢紊乱性疾病。

当前鹅痛风主要发生在雏鹅，5～15日龄多发，有时可见1日龄雏鹅发病，多种品种鹅均可发病，死亡率在30％～70％，发病前2～3天病鹅排石灰样稀便，脱水变瘦，然后大群出现精神沉郁、减料、干脚、脱水、呼吸困难等症状。剖检可见心包由白色尿酸盐包被，俗称“绒毛心”，肝脏、气囊浆膜面及关节处均有白色尿酸盐沉积，肾脏肿大、斑驳，输尿管扩张并有尿酸盐沉积。

引起雏鹅痛风的诱因很多，通常认为与饲料蛋白含量过高、肾功能不全、引种、饲养管理不当等有关，但最近研究发现排除这些因素后，还是会发生痛风，将病死鹅剖检脏器进行触片染色，经革兰氏染色和瑞氏染色后镜下观察未发现细菌。刮取肠内容物，生理盐水涂片，置低倍镜下观察，未见球虫卵囊。取气囊及关节处石灰样物做涂片，置低倍镜下观察，可见大量针尖大小的尿酸盐结晶物。根据养殖户描述、临床症状、剖检病变，初步诊断为疑似鹅病毒性感染引发破坏肝肾功能，导致尿酸盐沉积。

通过对雏鹅痛风的流行病学调查，发现该病在我国鹅群中发病率呈日益上升趋势。基于目前，国内外没有预防和治疗该病的商品化疫苗(或抗体)，该病还在不断蔓延。研制安全有效的疫苗及预防和治疗用卵黄抗体迫在眉睫，必须通过创新技术克服这一问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种使用鹅星状病毒制备的卵黄抗体，制备的卵黄抗体能有效的预防雏鹅痛风，从而弥补现有技术的不足。

本发明的卵黄抗体，是用保藏编号为CCTCC No：V201820的鹅星状病毒GD 0122株制备的灭活疫苗作为抗原制备的；

其中鹅星状病毒GD 0122株，于2018年5月13日保藏在武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：V201820。

本发明的卵黄抗体，其一种具体的制备方法如下：

1)对产蛋鸡进行免疫

用GD 0122株制备的灭活疫苗进行免疫；具体如下：

基础免疫每只鸡胸部肌肉注射疫苗0.5ml；

二次免疫在基础免疫后14日进行第2次接种，每只鸡胸部肌肉注射1.0ml；

三次免疫在二次免疫后14日进行第3次接种，每只鸡胸部肌肉注射1.0ml；

维持免疫：当卵黄中鹅星状病毒琼扩抗体效价1:96时，维持接种1次，每只鸡胸部肌肉注射疫苗1.0ml；

收蛋：三次强化免疫后10日，抽样取蛋，分离卵黄，提取抗体，鹅星状病毒琼扩抗体效价≥1:64为合格，收集高免鸡蛋。

2)抗体制造

收集蛋黄将蛋黄液加入巴氏灭菌罐中，加入适量的注射用水，搅拌混匀后，加热至65℃，保温灭活15分钟，灭活结束后，水浴冷却至30℃以下；