[发明专利]未结合雌三醇化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供一种未结合雌三醇化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，属于体外检测技术领域。该试剂盒包括：链霉亲和素磁颗粒悬浮液、化学发光标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体和偶联标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体。本发明还提供一种未结合雌三醇化学发光免疫检测试剂盒的制备方法。本发明的试剂盒采用链霉亲和素磁颗粒与偶联标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体可以牢牢的结合在一起，减少非特异性吸附，提高测试样本的准确度，抗干扰能力强。这种化学发光免疫分析试剂盒与仪器配套，减少人为操作误差，并且实现无人值守，缩短了临床检测所需的时间，同时检测精度较高，试剂与仪器组成封闭系统，系统误差小。

技术领域

本发明属于体外检测技术领域，具体涉及一种未结合雌三醇化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

未结合雌三醇是一种18碳类固醇类激素，分子量为288.4Da，在妊娠血中主要的循环雌激素，它指示胎盘的老化及成熟程度，是胎儿供氧的保障。在正常女性体内为雌酮和雌二醇的代谢产物。在体液中只有8％为游离型(FE3/UE3)，82％为结合型，结合型中大部分与性激素结合球蛋白结合，少量与白蛋白结合。在妊娠期间UE3是经胎儿肾上腺和肝脏产生，最后由胎盘合成的一种甾体类激素，胎儿的肾上腺把孕烯醇酮转化为脱氢表雄酮(DHEA)，DHEA在胎儿的肝脏中转化为16-OH-DHEA-硫酸盐，这种硫酸盐的单克隆抗体在胎盘转化为雌三醇，并通过胎盘进入母体血液，其在母体血清中的水平随着孕周的增长而增加。雌三醇在进入肝脏结合之前在母体血循环中的半衰期大约为20min。孕妇血清中游离态雌三醇含量为临床上指示胎盘功能的重要参数，也常用于非孕妇肿瘤病学筛查、乳腺癌及宫颈癌的风险评估等；新生儿患有唐氏综合症的孕妇通常UE3含量低于正常水平。

目前测定未结合雌三醇的方法有放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)、时间分辨荧光(TRFIA)等。但它们在应用中都存在一些固有的缺陷：RIA的放射性核素污染、标记物的货价期短、操作复杂、测试结果不稳定；EIA酶的活性容易失活，导致EIA的灵敏度不高，难以精确定量；TRFIA法虽然灵敏度较RIA高，但存在稀有重金属污染的风险。化学发光免疫分析法具有灵敏度高、准确定量、无放射性风险及其检测时间短，并且可以对抗原、抗体类目标物质进行检测。

UE3化学发光免疫测试剂盒相比传统的检测方法，抗原、抗体的结合是在相似的液体条件下进行，反应更加迅速灵敏；另一方面，UE3化学发光免疫测试剂盒与化学发光免疫检测仪器组成封闭系统，试剂、样本的添加及检测任务均由仪器自动完成，降低了人为操作的误差，提高了整个系统的灵敏度与准确度。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种未结合雌三醇化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，本发明的检测试剂盒检测精度高，时间短。

本发明首先提供一种未结合雌三醇化学发光免疫检测试剂盒，该试剂盒包括：

链霉亲和素磁颗粒悬浮液

化学发光标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体

偶联标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体

优选的是，所述的试剂盒中，链霉亲和素磁颗粒的质量比为0.01％～1％。

优选的是，所述的链霉亲和素磁颗粒悬浮液中，链霉亲和素磁颗粒的粒径为0.05～3μm。

优选的是，所述的化学发光标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体中，未结合雌三醇单克隆抗体与化学发光标记物的摩尔比为1:(3～20)。

优选的是，所述的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。

优选的是，所述的偶联标记物标记的未结合雌三醇单克隆抗体中，未结合雌三醇单克隆抗体与偶联标记物的摩尔比为1:(5～20)。

优选的是，所述的偶联标记物为生物素或抗原。