[发明专利]抗BCMA抗原的嵌合抗原受体及其应用

说明书

本发明属于基因工程领域，具体涉及一种靶向BCMA的嵌合抗原受体及其应用。所述嵌合抗原受体包含抗原识别区，铰链区，跨膜区和胞内信号域；所述胞外识别区氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。本发明提供的嵌合抗原受体在免疫细胞中表达后，可有效清除表达BCMA的肿瘤靶细胞，并且对抗原阴性的细胞无毒副作用，能够用于肿瘤的靶向治疗。

技术领域

本发明属于基因工程领域，涉及靶向BCMA的嵌合抗原受体及其应用，还涉及包含靶向BCMA的嵌合抗原受体的病毒载体和应用。

背景技术

多发性骨髓瘤又称multiple myeloma，简写为MM，据统计MM的高发年龄段在65-74岁，并发症包括高钙血症，肾脏机能不全、贫血和感染。虽然初次治疗MM对多种细胞毒性药物均较为敏感，但是由于高度异质性和耐药性MM复发概率高，目前不能治愈。2016年美国有30330名新生MM患者，有12650名患者死于MM，虽然中国国内没有系统的统计MM的发生率和病人生存情况，但是借鉴美国的数据可见目前已有的药物远不能解决MM患者的生存危机。而靶向CD19的CAR-T治疗在血液系统肿瘤中起到了较传统药物更优的疗效，利用CAR-T疗法治疗MM可能是一种可行并且有效的治疗方式。

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，CAR)是模拟TCR功能的人工受体，包括一个肿瘤相关抗原结合区、一个胞外间隔区、一个跨膜区和一个胞内信号区。胞内信号域通常为CD3ζ链或FcRγ，或与一种或多种共刺激分子相连，如4-1BB(CD137)，CD28，ICOS(CD278)。虽然靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞治疗在血液系统肿瘤治疗中取得了优异的成绩，但由于不同疾病所表达表面分子不同，MM细胞并不表达CD19，加之针对不同抗原不同抗体所激活的信号强度不同，因而筛选出针对MM的CAR组合仍然是CAR-T疗法治疗MM的关键点和难点。

BCMA全称为tumor necrosis factor receptor superfamily member 17，又称为B-cell maturation antigen(BCMA)或CD269或TNFRSF13A，主要表达于成熟B淋巴细胞和浆细胞表面，在MM组织和细胞中高表达，是治疗多发性骨髓瘤(MM)的合适的靶点。

常用的抗原识别区为单链抗体(scFV)，然而并非所有抗BCMA的抗体来源的scFV均可作为CAR结构中抗原识别区，不同scFV的特异性、亲和力、稳定性以及与不同铰链区的连接均有可能导致构建的CAR转导的CAR-T细胞不能有效的靶向肿瘤细胞甚至发生脱靶。因此需要进行大量的筛选和研究寻找更稳定有效的识别BCMA的scFV和最佳的CAR组合方案。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种靶向BCMA的嵌合抗原受体，本发明靶向BCMA的嵌合抗原受体能够更稳定的表达于T淋巴细胞，能更好的清除表达BCMA抗原的肿瘤靶细胞。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

抗BCMA的嵌合抗原受体，由识别BCMA的单链抗体(scFV)，铰链区，跨膜区和胞内信号组成；发明人选择8种抗BCMA抗体，通过筛选最优的VL和VH组合方式，筛选合适的Linker连接方式获得8种抗BCMA的scFV，进一步筛选和验证最佳的CAR组合方式，获得有效、稳定的抗BCMA的嵌合抗原受体。

进一步，抗BCMA抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，包含识别BCMA的抗原识别序列，铰链区，跨膜区和胞内信号域；所述识别BCMA的抗原识别序列氨基酸序列如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

进一步，编码所述识别BCMA的抗原识别序列核苷酸序列如SEQ ID NO.10或SEQ IDNO.11或SEQ ID NO.12所示。