[发明专利]叶黄素及其衍生物在制备抗脑胶质瘤药物中的应用

说明书

本发明涉及海洋药物领域，具体公开了坛紫菜中叶黄素的提取分离纯化方法以及叶黄素对恶性脑胶质瘤细胞的体外活性研究，最后对叶黄素抑制U87细胞迁移的机制进行了探究。本发明经超声波辅助有机溶剂对坛紫菜进行提取，并通过硅胶柱层析联合Sephadex LH‑20层析的方法获得的叶黄素具有较高的纯度，能够显著抑制U87细胞和U251细胞的增殖，对U87细胞的迁移能力具有明显的抑制作用，显著的促进U87细胞的凋亡，有效下调了U87细胞中p‑p38 MAPK、p‑ERK1/2、p‑MEK等与迁移相关的信号蛋白的表达。

技术领域

本发明属于海洋药物开发领域，具体涉及坛紫菜中叶黄素的提取、分离纯化及结构鉴定，叶黄素的体外抗脑胶质细胞的活性研究及其抗脑胶质瘤细胞迁移的机制探究。

技术背景

脑胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤，占所有原发性中枢神经系统肿瘤的32％。世卫组织(WHO)将脑胶质瘤分为四级，其中一半以上是恶性程度最高的多形性胶质母细胞(GBM)，GBM具有局部异质性和高度侵袭性，生长速度快，使得手术彻底切除困难，极易复发，且极易产生耐药性。并且由于血脑屏障的存在，使得绝大多数药物不能直接到达肿瘤部位，目前血脑屏障的结构并十分清楚，特别是转用机制并不清晰，故并非所有脂溶性的化合物都可以通过血脑屏障，研究表明只有某些特定结构的脂溶性化合物才不受血脑屏障的限制，因此导致恶性胶质瘤治疗困难，预后差。因此，有必要开发脂溶性的小分子化合物用于脑胶质瘤的治疗研究。

目前临床上常用的治疗脑胶质瘤的一线化疗药物是替莫唑胺，替莫唑胺是一种烷化剂，口服具有良好的生物学利用度和中枢神经系统通透性，但根据目前循环医学的证据表明，其临床效果也是不尽如人意，采用目前标准的替莫唑胺辅助化疗，新诊断GBM的5年生存率仅为9.8％，且极容易产生耐药性和全身性毒副作用，绝大多数患者仍难以避免肿瘤复发。因此，开发多靶点联合抑制剂可能是一种重要的尝试。而从天然产物中寻找具有抗肿瘤活性的成分或化合物，一直是抗肿瘤药物研发的热点。而且天然产物往往是通过多重药物靶点发挥作用的，除了直接作用于肿瘤细胞，还能够通过调节机体免疫机能，间接发挥抗肿瘤的作用，另外天然药物的毒副作用较小，药效较温和。在天然药物资源中，海洋生物资源是目前保留最完整且最具新药开发潜力的领域。其中研究最多的海洋植物主要包括红藻类、褐藻类、绿藻类、微藻类和红树林植物。这些海洋植物不仅是重要的食物来源，还含有许多丰富的生物活性物质，如卤代萜类、多酚类、脂类、多糖类和多肽类，这些物质大多数具有良好的抗氧化、抗肿瘤、抗炎、增强机体免疫力等功效，具有重要的药用价值，为新药开发提供了重要的来源，是天药物开发的研究热点之一。紫菜，隶属于红藻门，是一种重要的经济型海藻，种类较多，主要有条斑紫菜、坛紫菜、甘紫菜等。紫菜营养物质十分丰富，富含蛋白质、脂肪、多糖、胡萝卜素、膳食纤维以及多种维生素和矿物质。紫菜中含碘量很高，可用于辅助治疗因缺碘引起的甲状腺肿大。紫菜不仅是沿海居民重要的食物来源，同时还具有良好的药用价值。我国民间对紫菜的药用价值利用具有很悠久的历史，《本草纲目》记载，紫菜味甘、性寒，具有软坚散结、清热利尿等功效，对甲状腺肿大、慢性气管炎、动脉粥样硬化等具有较好的治疗作用。近几年，国内外对紫菜的药用价值的研究主要集中在紫菜多糖和蛋白质两方面，但有关紫菜中脂类化合物的抗肿瘤活性的文献报道较少，尤其是抗脑胶质瘤的活性未见有文献报道。