[发明专利]一种细胞内Ag+

权利要求书

1.一种细胞内Ag⁺的荧光成像方法，其特征在于利用设计并合成的、可与Ag⁺通过碱基错配识别的生物分子，并将其组装到具有中空、多孔结构特性的纳米金载体表面，一方面作为“孔帽”用于封堵纳米载体的孔口，防止孔内染料分子的外泄；另一方面作为Ag⁺的识别探针可与细胞内Ag⁺发生特异性的碱基错配识别反应，形成C-Ag⁺-C碱基对的同时发生构象转化而脱离纳米金载体表面，从而使封堵的“孔帽”被打开，纳米载体内的染料分子得以释放，实现细胞内Ag⁺的荧光成像，步骤如下：

(1)设计并合成可与Ag⁺通过碱基错配识别的、具有一定碱基长度的、富含胞嘧啶的核酸生物分子，该核酸生物分子能够与Ag⁺发生特异性的碱基错配识别反应；

(2)将聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液与具有中空、多孔结构的纳米金载体混合，10-12h后离心分离，移除上清液；

(3)加入染料分子溶液，10-12h后加入(1)步设计并合成的、可识别Ag⁺的核酸生物分子溶液，10-12h后离心分离，移除上清液，用MOPS缓冲溶液稀释备用；

(4)取适量细胞悬浮液，离心分离，移除上清液，使用Ag⁺溶液培养细胞后离心，移除上清液；

(5)加入(3)步制得的溶液孵育细胞后进行激光共聚焦扫描成像；

所述的可与Ag⁺通过碱基错配识别的核酸生物分子，其碱基序列为5’-TCC TCC CTC CTTAAG GAA CCA CCC ACC A-3’；所述的染料分子是罗丹明B；所述的细胞是Hela细胞。